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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达蛋白分子量大小
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白分子量大小

我最近想要做蛋白原核表达，我想请问一下各位达人28a和32a的N端和C端都有his标签吗？如果有的话，28a的N端标签大小总共为多少？32a的N端标签大小总共为多少？4T-1的GST标签蛋白的大小总共为多少？谢谢
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在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
1楼 2012-09-27 15:42:29
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

给你看一张我截图的PET28，表达和终止给你标出来了，其实这不是固定的，要看你怎么去设计基因的位置。

搜狗截图_2012-09-28_10-10-11.png
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10楼2012-09-28 10:13:00
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
标签就是六个HIS氨基酸的大小了。
GST表达出来大概是26kD
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2楼2012-09-27 16:42:43
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-27 16:42:43
标签就是六个HIS氨基酸的大小了。
GST表达出来大概是26kD

我听说32a的17kd,28a的3kd
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在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
3楼2012-09-27 17:55:28
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuqingchun33 at 2012-09-27 17:55:28
我听说32a的17kd,28a的3kd...

不就个标签么？差那么大？不行你看看载体图谱
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4楼2012-09-28 00:01:42
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个要看你的酶切位点了，看带标签在内在你的基因之前或者之后上引入多少个AA，然后9AA=1KDa，自己算算。
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Thank-you，so-blue.
5楼2012-09-28 09:17:45
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by susizheng at 2012-09-28 09:17:45
这个要看你的酶切位点了，看带标签在内在你的基因之前或者之后上引入多少个AA，然后9AA=1KDa，自己算算。

我的酶切位点是sal1和xhol，请问除了我的目的基因外，28a，32a和4T1的蛋白标签的大小分别是多少？谢谢
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在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
6楼2012-09-28 09:36:08
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-28 00:01:42
不就个标签么？差那么大？不行你看看载体图谱...

弱弱的问一下载体的图谱从哪里开始算起？是启动子吗
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在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
7楼2012-09-28 09:39:06
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by xuqingchun33 at 2012-09-28 09:39:06
弱弱的问一下载体的图谱从哪里开始算起？是启动子吗...

不是，表达蛋白的大小从载体的起始密码子算起，不是基因的起始密码子。
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Thank-you，so-blue.
8楼2012-09-28 09:43:06
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by xuqingchun33 at 2012-09-28 09:39:06
弱弱的问一下载体的图谱从哪里开始算起？是启动子吗...

从T7启动子之后算起，第一个ATG开始，到TGA为止。
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9楼2012-09-28 10:07:52
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