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id90

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求教,如何从两条相近的电泳条带中确定目的蛋白 已有2人参与

最近在做溶菌酶的纯化,电泳后在估计的分子量处有两条带。不能确定哪条带是目的蛋白,我所纯化的蛋白具有抑菌效果。打算跑native-page,但是跑完后如何确定目的条带,直接切胶条做抑菌实验? 还是胶条磨碎,回收后再做抑菌,我纯化出的蛋白浓度很低,担心回收后量太低没有抑菌效果。
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八点豆浆

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可切胶做蛋白质质谱鉴定 然后搜索以目标蛋白氨基酸序列建的自建库
2楼2014-10-15 09:36:36
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id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 八点豆浆 at 2014-10-15 09:36:36
可切胶做蛋白质质谱鉴定 然后搜索以目标蛋白氨基酸序列建的自建库

这个太复杂了吧 我只想想根据它的抑菌的特性分析出来
3楼2014-10-15 23:14:10
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wlm0917

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
活性电泳,直接在胶上接种不行吗
4楼2014-10-16 17:34:41
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id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wlm0917 at 2014-10-16 17:34:41
活性电泳,直接在胶上接种不行吗

什么是活性电泳?就是非变性电泳吗?电泳胶上没有营养物质,微生物能够生长吗? 有没有参考文献可以看的,谢谢!
5楼2014-10-17 22:47:47
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123abcd..

新虫 (初入文坛)

你好,我也是做这个的,小分子量蛋白,我就跑不出来条带,总是一片,请问你怎么跑的?电泳具体的借鉴一下
6楼2016-03-30 11:13:27
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