24小时热门版块排行榜    

查看: 2114  |  回复: 16

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

[求助] 大豆蛋白的电泳总是跑不出来,求解!! 已有9人参与

新手,做了很多次了,最近几次都是图上的样子
用的胶是自己配的,12.5%的分离胶,4.5%的浓缩胶,跑的时候电压220,到现在marker都没出来,还是因为胶不行吗?
到底是哪的问题呀……快疯了~

大豆蛋白的电泳总是跑不出来,求解!!
IMG_2073.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得应该是胶的问题,不知道你的buffer配方及pH都是怎样的?
2楼2015-06-30 11:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
mark都没跑出来一般就是你的胶以及电泳液的问题,可以再找一个人与你一起做这个蛋白表达电泳,做个对比看看
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
3楼2015-06-30 11:28:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

相忘于少年

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电压太高了,120就差不多了。跑胶用的一切试剂最好都换新配的。提高蛋白浓度试试

[ 发自小木虫客户端 ]
修和无人见,存心有天知。
4楼2015-06-30 13:45:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-06-30 11:15:56
个人觉得应该是胶的问题,不知道你的buffer配方及pH都是怎样的?

A液是30%丙烯酰胺定容,B液是1.5M的Tris-HCl,pH8.8,C液是0.5M的Tris-HCl,pH6.8,D液是10%过硫酸铵。
5楼2015-06-30 14:41:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yoziqueen at 2015-06-30 14:41:04
A液是30%丙烯酰胺定容,B液是1.5M的Tris-HCl,pH8.8,C液是0.5M的Tris-HCl,pH6.8,D液是10%过硫酸铵。...

只有这四种成分吗?SDS、TEMED也都按比例加了吗?
6楼2015-06-30 14:46:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by a86052 at 2015-06-30 14:46:52
只有这四种成分吗?SDS、TEMED也都按比例加了吗?...

分离胶用的12.5%的,TEMED10微升,配胶是ABCD加上TEMED还有水呀~~SDS在Tris-HCl里都有加
7楼2015-06-30 15:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香樟树yh

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议恒流  浓缩胶6毫安 40分钟   分离胶12毫安  60分钟
博士要毕业了
8楼2015-06-30 15:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半梦半醒间

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能告诉我你的大豆蛋白分子量是多大的吗?谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
玻璃心!!!
9楼2015-06-30 16:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangminggj

禁虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

10楼2015-06-30 17:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoziqueen 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 4/200 2026-11-07 16:50 by Xc2FxHsHkBNc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 16:17 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见