24小时热门版块排行榜    

查看: 2044  |  回复: 16

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

[求助] 大豆蛋白的电泳总是跑不出来,求解!! 已有9人参与

新手,做了很多次了,最近几次都是图上的样子
用的胶是自己配的,12.5%的分离胶,4.5%的浓缩胶,跑的时候电压220,到现在marker都没出来,还是因为胶不行吗?
到底是哪的问题呀……快疯了~

大豆蛋白的电泳总是跑不出来,求解!!
IMG_2073.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得应该是胶的问题,不知道你的buffer配方及pH都是怎样的?
2楼2015-06-30 11:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
mark都没跑出来一般就是你的胶以及电泳液的问题,可以再找一个人与你一起做这个蛋白表达电泳,做个对比看看
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
3楼2015-06-30 11:28:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

相忘于少年

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电压太高了,120就差不多了。跑胶用的一切试剂最好都换新配的。提高蛋白浓度试试

[ 发自小木虫客户端 ]
修和无人见,存心有天知。
4楼2015-06-30 13:45:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-06-30 11:15:56
个人觉得应该是胶的问题,不知道你的buffer配方及pH都是怎样的?

A液是30%丙烯酰胺定容,B液是1.5M的Tris-HCl,pH8.8,C液是0.5M的Tris-HCl,pH6.8,D液是10%过硫酸铵。
5楼2015-06-30 14:41:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yoziqueen at 2015-06-30 14:41:04
A液是30%丙烯酰胺定容,B液是1.5M的Tris-HCl,pH8.8,C液是0.5M的Tris-HCl,pH6.8,D液是10%过硫酸铵。...

只有这四种成分吗?SDS、TEMED也都按比例加了吗?
6楼2015-06-30 14:46:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoziqueen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by a86052 at 2015-06-30 14:46:52
只有这四种成分吗?SDS、TEMED也都按比例加了吗?...

分离胶用的12.5%的,TEMED10微升,配胶是ABCD加上TEMED还有水呀~~SDS在Tris-HCl里都有加
7楼2015-06-30 15:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香樟树yh

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议恒流  浓缩胶6毫安 40分钟   分离胶12毫安  60分钟
博士要毕业了
8楼2015-06-30 15:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半梦半醒间

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能告诉我你的大豆蛋白分子量是多大的吗?谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
玻璃心!!!
9楼2015-06-30 16:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangminggj

禁虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

10楼2015-06-30 17:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoziqueen 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见