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1楼 2014-10-08 09:29:22

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圆yy

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1、电压调到100v左右
2、胶浓度1.5%左右
3、电泳缓冲液新配
看看结果还会不会那个样子

3楼2014-10-08 10:53:17

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cuihao102

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貌似你的胶本身就有问题，除了marker，你的产物也没分开啊！配胶的缓冲液浓度和电泳缓冲液浓度一致不，胶浓度大小也需要考虑，不同大小的片段需用不同浓度的胶

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4楼2014-10-08 11:50:53

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生物是个坑

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缓冲液换新的，胶浓度调至2.5%，一般来说凝胶浓度对应着线性双链DNA的分离范围。50bp-2000bp对应的胶浓度是2.0%。楼主50bp的ladder建议胶浓度在2.5%。再有就是电场强度，跑电泳是不能只看是多少电压，而是应该计算电场强度。通常小片段DNA（小于1000bp）使用相对较高的电场强度（比如7.5V/cm）;电场强度计算方法是电压与正负电极之间距离的比例，也就是你通电后槽里那两条冒泡的线之间的距离和电压的比值。

7楼2014-10-08 15:44:31

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cya_yanan

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图中的maker，条带都推挤在一起了，显然没跑开，所以看上去区分不明显.110v 时间多长啊？可能时间短了提高电压或时间，我一般120v 25min 左右

13楼2014-10-08 17:18:59

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yunshenglmm

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胶浓度提高到1.2%-2%，应该能够把小片段分开，但是胶浓度高，凝胶会很快，配胶的时候需要迅速

2楼2014-10-08 10:16:55

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考虑下浓度的问题吧

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5楼2014-10-08 12:17:50

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gejiaoyu

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考虑缓冲液与制胶的缓冲液浓度是否一致

老农民

6楼2014-10-08 14:54:58

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2楼: Originally posted by yunshenglmm at 2014-10-08 10:16:55
胶浓度提高到1.2%-2%，应该能够把小片段分开，但是胶浓度高，凝胶会很快，配胶的时候需要迅速

我的胶浓度是2%的，忘了说了。。

8楼2014-10-08 16:40:54

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3楼: Originally posted by 圆yy at 2014-10-08 10:53:17
1、电压调到100v左右
2、胶浓度1.5%左右
3、电泳缓冲液新配
看看结果还会不会那个样子

你说的第二三点我之前都是这样做的，就是电压高低与maker能否跑开有没有很大关系啊？

9楼2014-10-08 16:42:50

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7楼: Originally posted by 生物是个坑 at 2014-10-08 15:44:31
缓冲液换新的，胶浓度调至2.5%，一般来说凝胶浓度对应着线性双链DNA的分离范围。50bp-2000bp对应的胶浓度是2.0%。楼主50bp的ladder建议胶浓度在2.5%。再有就是电场强度，跑电泳是不能只看是多少电压，而是应该计算电 ...

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