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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么maker跑不开？
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Restarter

金虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by gejiaoyu at 2014-10-08 14:54:58
考虑缓冲液与制胶的缓冲液浓度是否一致

我用的都是一样的缓冲液啊！
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11楼2014-10-08 16:46:10
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Restarter

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 生物是个坑 at 2014-10-08 15:44:31
缓冲液换新的，胶浓度调至2.5%，一般来说凝胶浓度对应着线性双链DNA的分离范围。50bp-2000bp对应的胶浓度是2.0%。楼主50bp的ladder建议胶浓度在2.5%。再有就是电场强度，跑电泳是不能只看是多少电压，而是应该计算电 ...

谢谢啊 ！
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12楼2014-10-08 16:49:32
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cya_yanan

银虫 (小有名气)
图中的maker，条带都推挤在一起了，显然没跑开，所以看上去区分不明显.110v 时间多长啊？可能时间短了 提高电压或时间，我一般120v 25min 左右
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13楼2014-10-08 17:18:59
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Restarter

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cya_yanan at 2014-10-08 17:18:59
图中的maker，条带都推挤在一起了，显然没跑开，所以看上去区分不明显.110v 时间多长啊？可能时间短了 提高电压或时间，我一般120v 25min 左右

跑倒是跑了半个多小时呢，再跑就都跑出去了，是不是电压还要降低，这样就多跑一些时间！
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14楼2014-10-08 21:40:07
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microgen

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Restarter(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-09 11:02:10
除了电场强度和胶浓度以外，貌似还可能有三种原因：
1.电泳时温度过高
2.缓冲液失效
3.配胶问题，或者胶放置时间过久
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15楼2014-10-08 22:05:14
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单体化合物

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
maker当然跑不开了，能跑开的是marker

[ 发自小木虫客户端 ]
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16楼2014-10-08 22:35:02
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Restarter

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 单体化合物 at 2014-10-08 22:35:02
maker当然跑不开了，能跑开的是marker

呃呃，写错了，受教受教，呵呵

[ 发自小木虫客户端 ]
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17楼2014-10-08 22:59:12
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青师大涛声

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Restarter(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-09 11:03:03
你要的目的片段比较小，所以大的胶浓度条带不能跑开，建议胶的浓度低一些。另外也不排除Marker和DNA的质量可能引起了问题，你的Marker和DNA冷存上是否上有疏忽啊？
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好好做实验。
18楼2014-10-08 23:06:46
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星小源

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是胶没有凝好啊？
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19楼2014-10-09 10:09:45
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Restarter

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 青师大涛声 at 2014-10-08 23:06:46
你要的目的片段比较小，所以大的胶浓度条带不能跑开，建议胶的浓度低一些。另外也不排除Marker和DNA的质量可能引起了问题，你的Marker和DNA冷存上是否上有疏忽啊？

片段小要分开的话不正要用浓度大点的胶吗，在低浓度的胶上大小差距不多的片段跑的差不多快，这样分不开了啊，不过这属于我自己的理解maker和DNA应该都是没有问题的，谢谢啦！
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20楼2014-10-09 21:38:26
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