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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么maker跑不开？
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Restarter

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么maker跑不开？ 已有10人参与

maker为什么跑不开啊，我点的是50bp的maker，可以分开9条带，分别是500、400、350、300、250、200、150、100、50，而我要的是170的片段，我用的是那种小的电泳槽，估计10*20平方厘米大，电压用的110V，下面是我跑胶结果，请能人指导指导！

为什么maker跑不开？
2014.10.7.2.jpg
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1楼 2014-10-08 09:29:22
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Restarter

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 生物是个坑 at 2014-10-08 15:44:31
缓冲液换新的，胶浓度调至2.5%，一般来说凝胶浓度对应着线性双链DNA的分离范围。50bp-2000bp对应的胶浓度是2.0%。楼主50bp的ladder建议胶浓度在2.5%。再有就是电场强度，跑电泳是不能只看是多少电压，而是应该计算电 ...

谢谢，我马上试一下！
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10楼2014-10-08 16:44:24
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yunshenglmm

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-08 12:29:00
Restarter: 金币+1 2014-10-08 16:47:17
胶浓度提高到1.2%-2%，应该能够把小片段分开，但是胶浓度高，凝胶会很快，配胶的时候需要迅速
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2楼2014-10-08 10:16:55
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圆yy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-08 12:29:06
Restarter: 金币+2 2014-10-08 16:47:08
1、电压调到100v左右
2、胶浓度1.5%左右
3、电泳缓冲液新配
看看结果还会不会那个样子
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3楼2014-10-08 10:53:17
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-08 12:29:12
Restarter: 金币+2 2014-10-08 16:46:56
貌似你的胶本身就有问题，除了marker，你的产物也没分开啊！配胶的缓冲液浓度和电泳缓冲液浓度一致不，胶浓度大小也需要考虑，不同大小的片段需用不同浓度的胶

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-10-08 11:50:53
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