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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA的Marker总跑不开是什么原因？
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ruililian09

银虫 (小有名气)

[求助] DNA的Marker总跑不开是什么原因？

我们用的伯乐的电泳仪，每次电泳Marker都只能跑开3-4条带，用大梳子的时候好一点，有的时候条带还有点锯齿型，是什么原因呢？应如何改进？电泳缓冲液用的是1×TAE（用50×TAE稀释，但配的时间有点久了），电压一般为100-120V。
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1楼 2012-09-27 15:37:02
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xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是胶的问题，建议做胶时多煮一下，还有，电泳液最好重新配一下，电压150V左右
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2楼2012-09-27 17:02:39
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hourl11

禁虫 (初入文坛)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-28 14:43:20
本帖内容被屏蔽
3楼2012-09-27 17:28:04
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的胶一定要混匀，EB也要加适量、混匀，电压可以调高一点，只要不超过最大限度就可以！
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持之以恒、永不放弃！
4楼2012-09-27 18:56:42
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ruililian09

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hourl11 at 2012-09-27 17:28:04
如果Maker没问题的话（可以换别的Maker试试），那就肯定是你的胶配得不合适，琼脂糖的质量、浓度，EB添加量，胶的均匀程度都是影响因素，琼脂糖尽量买质量好的，我们用的是1%的浓度，煮沸后一定要摇匀，EB一定要微量 ...

我们使用荧光染料做的，琼脂糖也是很好，浓度也是1%，可能溶胶的时候没有很在意吧！
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5楼2012-09-27 20:15:52
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ruililian09

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-27 18:56:42
你的胶一定要混匀，EB也要加适量、混匀，电压可以调高一点，只要不超过最大限度就可以！

电压高一点，有助于Marker跑开吗？
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6楼2012-09-27 20:16:18
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sanbanwu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ruililian09: 金币+3, ★★★很有帮助, 嗯，我确实是反复溶胶的，没用完的下次再用，就大概估计一下浓度，次数多了肯定差很多，我下次注意下，谢谢啦！ 2012-09-28 10:20:16
应该是你的胶的问题，因为在你配胶，以及后期反复热胶的过程中，它会损失水分，最后胶的浓度会大于1%
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7楼2012-09-28 09:25:00
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker放4度就好了
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在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
8楼2012-09-28 09:43:58
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ruililian09

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xuqingchun33 at 2012-09-28 09:43:58
marker放4度就好了

反复冻融会影响Marker的条带吗？我一直是放-20度的，用的时候拿出来。
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9楼2012-09-28 10:21:09
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是胶的问题，终浓度肯定比1%大了，配胶的时候多加点TAE，减少蒸发的损失，另外可以适当提高一下电压！
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10楼2012-09-28 23:08:12
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