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ruililian09

银虫 (小有名气)

[求助] DNA的Marker总跑不开是什么原因?

我们用的伯乐的电泳仪,每次电泳Marker都只能跑开3-4条带,用大梳子的时候好一点,有的时候条带还有点锯齿型,是什么原因呢?应如何改进?电泳缓冲液用的是1×TAE(用50×TAE稀释,但配的时间有点久了),电压一般为100-120V。
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xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是胶的问题,建议做胶时多煮一下,还有,电泳液最好重新配一下,电压150V左右
2楼2012-09-27 17:02:39
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hourl11

禁虫 (初入文坛)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-28 14:43:20
本帖内容被屏蔽

3楼2012-09-27 17:28:04
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的胶一定要混匀,EB也要加适量、混匀,电压可以调高一点,只要不超过最大限度就可以!
持之以恒、永不放弃!
4楼2012-09-27 18:56:42
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ruililian09

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hourl11 at 2012-09-27 17:28:04
如果Maker没问题的话(可以换别的Maker试试),那就肯定是你的胶配得不合适,琼脂糖的质量、浓度,EB添加量,胶的均匀程度都是影响因素,琼脂糖尽量买质量好的,我们用的是1%的浓度,煮沸后一定要摇匀,EB一定要微量 ...

我们使用荧光染料做的,琼脂糖也是很好,浓度也是1%,可能溶胶的时候没有很在意吧!
5楼2012-09-27 20:15:52
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ruililian09

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-27 18:56:42
你的胶一定要混匀,EB也要加适量、混匀,电压可以调高一点,只要不超过最大限度就可以!

电压高一点,有助于Marker跑开吗?
6楼2012-09-27 20:16:18
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sanbanwu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ruililian09: 金币+3, ★★★很有帮助, 嗯,我确实是反复溶胶的,没用完的下次再用,就大概估计一下浓度,次数多了肯定差很多,我下次注意下,谢谢啦! 2012-09-28 10:20:16
应该是你的胶的问题,因为在你配胶,以及后期反复热胶的过程中,它会损失水分,最后胶的浓度会大于1%
7楼2012-09-28 09:25:00
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker放4度就好了
在这个纷绕的世俗世界里,能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切,也是一种境界。
8楼2012-09-28 09:43:58
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ruililian09

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xuqingchun33 at 2012-09-28 09:43:58
marker放4度就好了

反复冻融会影响Marker的条带吗?我一直是放-20度的,用的时候拿出来。
9楼2012-09-28 10:21:09
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是胶的问题,终浓度肯定比1%大了,配胶的时候多加点TAE,减少蒸发的损失,另外可以适当提高一下电压!
10楼2012-09-28 23:08:12
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