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liuqingrui5

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE还原与非还原电泳条带一样能说明该蛋白只有一个亚基吗

SDS-PAGE还原与非还原电泳条带一样能说明该蛋白只有一个亚基吗？非还原电泳不加还原剂、不加热
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1楼2013-08-27 08:07:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-27 21:54:42
liuqingrui5: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2013-08-30 15:14:04
不能。如果还原胶和非还原胶跑得位置相同说明目标蛋白没有形成分子间二硫键。有很多多聚体蛋白亚基不是靠二硫键结合在一起的。那些靠次级键结合的亚基在变性剂SDS的作用下都会遭到破坏，所以不能判断是否形成多聚体。
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2楼2013-08-27 12:53:37
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liuqingrui5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-27 12:53:37
不能。如果还原胶和非还原胶跑得位置相同说明目标蛋白没有形成分子间二硫键。有很多多聚体蛋白亚基不是靠二硫键结合在一起的。那些靠次级键结合的亚基在变性剂SDS的作用下都会遭到破坏，所以不能判断是否形成多聚体 ...

谢谢。在无法测定整个蛋白分子量的时候，怎么确定一个蛋白只含有一个亚基啊呢
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3楼2013-08-27 14:43:04
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-27 22:24:44
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuqingrui5 at 2013-08-27 14:43:04
谢谢。在无法测定整个蛋白分子量的时候，怎么确定一个蛋白只含有一个亚基啊呢...

可以跑native-PAGE，确定大致分子量，与SDS-PAGE比较。
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4楼2013-08-27 21:56:15
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
cicelyzh：你先搞清楚亚基的定义！subunit就是没有共价键靠次级键连接在一起的多条肽链！
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5楼2014-08-24 12:17:18
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
SDS-PAGE还原与非还原电泳条带一样能说明该蛋白只有一个亚基吗？非还原电泳不加还原剂、不加热。一般是说明该蛋白只有一个亚基，最好再用质谱测定一下分子量。次级键包括：离子键、氢键、疏水相互作用、范德华力，就是没有共价键。subunit的定义：请看.L.Nelson,M.M.Cox ,Lehninger Principle of Biochemistry,Freeman,2008,5th edition.
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6楼2014-08-24 12:22:23
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
subunit的定义：请看:
L.Nelson,M.M.Cox ,Lehninger Principle of Biochemistry,Freeman,2008,5th edition.
陶慰孙、李惟、姜涌明 主编，蛋白质分子基础，高教出版社，1995，第二版。
在小木虫都有下载，自己搜一下吧。
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7楼2014-08-24 12:24:20
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