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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图条带分析

做电泳的实验很多次都这样,求助!万分感激!
做了很多次为什么下面都会有一条线呢?
而且不出现条带。感觉拖尾很严重似的。

我进的样品是茶叶中的粗蛋白(需要分离的目标组分分子量大概是在30K到50K),左边的MARKER(2K到100K)。浓缩胶5%,分离胶12%。跑电泳的时间大概是2个小时左右。
SDS-PAGE电泳图条带分析
未命名.jpg


SDS-PAGE电泳图条带分析-1
12.jpg
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BellZhu

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:56
amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:50
应该是溴酚蓝形成的,大小应该在10kD到20kD之间,跟你的上样量有关,不过影响不大
5楼2013-06-06 09:17:54
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

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amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:51
我个人认为是你的胶没有做好,你的marker都没有走出个胶样,更何况你的样品呢!最好检查一下你的buffer的pH,6.8-8.8.
6楼2013-06-06 09:59:59
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

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amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:55
应梦贤臣(amisking代发): 金币+2, 感谢 2013-06-07 20:26:00
1.你的胶做的不好,Marker都没跑好,确认一下你的胶浓度是否合适。
2.那条线是溴酚蓝指示剂造成的,一般影响不大。
3.你的样品没有条带,最大的可能是没有提出来蛋白,可以换一下其他的提取液(主要是pH差异)试试看。
踏踏实实做好自己,其他的事与你无关。
10楼2013-06-07 17:00:54
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:28
你说的线应该是溴酚蓝指示剂前沿。至于样品为什么没有带,应该是样品的问题,因为marker的条带还算正常。你样品的上样量是多少微克蛋白?
2楼2013-06-06 02:58:09
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crystal9002

铁虫 (初入文坛)

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:40
那条底部蓝色的带子我也见过 不影响结果 你load了多少sample?会不会是浓度太低看不出来?
3楼2013-06-06 03:37:55
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mitocam

新虫 (正式写手)

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蛋白质会不会降解了?
4楼2013-06-06 05:37:01
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songzuowei

木虫 (著名写手)

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应梦贤臣(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-10 17:00:07
我也认为是你的胶制的不行,还有下面那条线就是溴酚蓝,你不用管它,我经常出现这种情况
7楼2013-06-06 12:10:28
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502549180

银虫 (小有名气)

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你这没有条带吧,好像没蛋白呀。
8楼2013-06-06 13:52:08
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linxt2005

金虫 (小有名气)

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电泳缓冲液是什么情况?新的还是旧的,更换一下试试。
小兵一个
9楼2013-06-06 16:51:37
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