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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图条带分析

做电泳的实验很多次都这样，求助！万分感激！
做了很多次为什么下面都会有一条线呢？
而且不出现条带。感觉拖尾很严重似的。

我进的样品是茶叶中的粗蛋白(需要分离的目标组分分子量大概是在30K到50K)，左边的MARKER（2K到100K）。浓缩胶5%，分离胶12%。跑电泳的时间大概是2个小时左右。
SDS-PAGE电泳图条带分析
未命名.jpg


SDS-PAGE电泳图条带分析-1
12.jpg
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1楼 2013-06-05 20:03:22
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回帖置顶 ( 共有3个 )

BellZhu

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:56
amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:50
应该是溴酚蓝形成的，大小应该在10kD到20kD之间，跟你的上样量有关，不过影响不大
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5楼2013-06-06 09:17:54
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:01:07
amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:51
我个人认为是你的胶没有做好，你的marker都没有走出个胶样，更何况你的样品呢！最好检查一下你的buffer的pH，6.8-8.8.
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6楼2013-06-06 09:59:59
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:55
应梦贤臣(amisking代发): 金币+2, 感谢 2013-06-07 20:26:00
1.你的胶做的不好，Marker都没跑好，确认一下你的胶浓度是否合适。
2.那条线是溴酚蓝指示剂造成的，一般影响不大。
3.你的样品没有条带，最大的可能是没有提出来蛋白，可以换一下其他的提取液（主要是pH差异）试试看。
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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
10楼2013-06-07 17:00:54
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:28
你说的线应该是溴酚蓝指示剂前沿。至于样品为什么没有带，应该是样品的问题，因为marker的条带还算正常。你样品的上样量是多少微克蛋白？
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2楼2013-06-06 02:58:09
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crystal9002

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:40
那条底部蓝色的带子我也见过 不影响结果 你load了多少sample？会不会是浓度太低看不出来？
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3楼2013-06-06 03:37:55
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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蛋白质会不会降解了？
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4楼2013-06-06 05:37:01
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songzuowei

木虫 (著名写手)

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★
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应梦贤臣(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-10 17:00:07
我也认为是你的胶制的不行，还有下面那条线就是溴酚蓝，你不用管它，我经常出现这种情况
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7楼2013-06-06 12:10:28
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502549180

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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你这没有条带吧，好像没蛋白呀。
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8楼2013-06-06 13:52:08
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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电泳缓冲液是什么情况？新的还是旧的，更换一下试试。
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小兵一个
9楼2013-06-06 16:51:37
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