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guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品重新制备,换提取方法,推荐TCA/丙酮 苯酚法,刚做了茶叶的2D,结果很好
11楼2013-06-07 19:28:02
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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by guxinhan123 at 2013-06-07 19:28:02
样品重新制备,换提取方法,推荐TCA/丙酮 苯酚法,刚做了茶叶的2D,结果很好

多谢,不过每次做后面都出现一条横贯线,不知道是怎么的
12楼2013-06-08 11:37:24
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fuding6

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最下面的条带是溴酚蓝的条带,至于你的样品没条带,可能是你的茶蛋白没提取好。
13楼2013-06-08 13:34:43
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yayabanyan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
您的蛋白质提取出来后纯化了吗?Marker 还算正常,考虑下是否是蛋白质样品里残留的盐离子影响的。如果盐离子浓度太高跑不出条带的。可以用TCA-丙酮沉淀法纯化。
14楼2013-06-08 18:18:45
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我认为那条横纹线肯能是你的胶的质量有问题,即在胶的表面在该处有不均匀甚至微小但是连续的裂纹,导致了色素的沉积,至于是不是溴酚蓝造成的,我不清楚。
15楼2013-06-08 18:34:08
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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by BellZhu at 2013-06-06 09:17:54
应该是溴酚蓝形成的,大小应该在10kD到20kD之间,跟你的上样量有关,不过影响不大

先多谢了,不过有没有什么方法可以避免呢?我做了很多次都这样
16楼2013-06-08 22:01:32
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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-06-06 09:59:59
我个人认为是你的胶没有做好,你的marker都没有走出个胶样,更何况你的样品呢!最好检查一下你的buffer的pH,6.8-8.8.

我重新配置了,也检查了PH应该没有问题,而且我用其他师兄提取的粗蛋白,出现了条带,但是用自己的就不出现,而且都出现了最后的一条横贯线,不知道怎么回事
17楼2013-06-09 23:57:34
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

好吧!弄个别人做的胶,或者把你的样品交给别人跑,只有你的marker跑出正确的分布那时候你才能说你的样品的问题!
18楼2013-06-10 10:33:01
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小猪猪de烦恼

金虫 (初入文坛)

楼主,请问你的这个问题解决了吗?我最近也遇到类似的情况,一直找不出原因,急!!!!!
19楼2014-09-01 16:39:08
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linli19949

新虫 (初入文坛)

你好,我跑茶蛋白的胶的时候,也是没有出现条带的,请问你后来是怎么解决的?
20楼2017-04-10 16:53:32
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