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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图条带分析

做电泳的实验很多次都这样，求助！万分感激！
做了很多次为什么下面都会有一条线呢？
而且不出现条带。感觉拖尾很严重似的。

我进的样品是茶叶中的粗蛋白(需要分离的目标组分分子量大概是在30K到50K)，左边的MARKER（2K到100K）。浓缩胶5%，分离胶12%。跑电泳的时间大概是2个小时左右。
SDS-PAGE电泳图条带分析
未命名.jpg


SDS-PAGE电泳图条带分析-1
12.jpg
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1楼 2013-06-05 20:03:22
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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-06-06 09:59:59
我个人认为是你的胶没有做好，你的marker都没有走出个胶样，更何况你的样品呢！最好检查一下你的buffer的pH，6.8-8.8.

我重新配置了，也检查了PH应该没有问题，而且我用其他师兄提取的粗蛋白，出现了条带，但是用自己的就不出现，而且都出现了最后的一条横贯线，不知道怎么回事
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17楼2013-06-09 23:57:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:28
你说的线应该是溴酚蓝指示剂前沿。至于样品为什么没有带，应该是样品的问题，因为marker的条带还算正常。你样品的上样量是多少微克蛋白？
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2楼2013-06-06 02:58:09
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crystal9002

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:40
那条底部蓝色的带子我也见过 不影响结果 你load了多少sample？会不会是浓度太低看不出来？
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3楼2013-06-06 03:37:55
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白质会不会降解了？
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4楼2013-06-06 05:37:01
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