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应梦贤臣

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳图条带分析

做电泳的实验很多次都这样,求助!万分感激!
做了很多次为什么下面都会有一条线呢?
而且不出现条带。感觉拖尾很严重似的。

我进的样品是茶叶中的粗蛋白(需要分离的目标组分分子量大概是在30K到50K),左边的MARKER(2K到100K)。浓缩胶5%,分离胶12%。跑电泳的时间大概是2个小时左右。
SDS-PAGE电泳图条带分析
未命名.jpg


SDS-PAGE电泳图条带分析-1
12.jpg
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BellZhu

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:56
amisking: 回帖置顶 2013-06-07 20:25:50
应该是溴酚蓝形成的,大小应该在10kD到20kD之间,跟你的上样量有关,不过影响不大
5楼2013-06-06 09:17:54
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:28
你说的线应该是溴酚蓝指示剂前沿。至于样品为什么没有带,应该是样品的问题,因为marker的条带还算正常。你样品的上样量是多少微克蛋白?
2楼2013-06-06 02:58:09
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crystal9002

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
应梦贤臣(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-06 11:00:40
那条底部蓝色的带子我也见过 不影响结果 你load了多少sample?会不会是浓度太低看不出来?
3楼2013-06-06 03:37:55
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白质会不会降解了?
4楼2013-06-06 05:37:01
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