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雪中花sml

新虫 (小有名气)

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[求助] 空质粒做PCR也能P出目的条带已有6人参与

最近构建质粒，在筛选的过程中发现空质粒作模板也能P出我的目的基因条带，无法有效筛选重组的质粒，求大神帮忙解决这种问题

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向着前方迈进

1楼 2015-05-29 19:48:15

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雪中花sml

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引用回帖:

3楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-05-30 00:22:12
LZ你PCR体系污染的可能性是不小的
1.你最初是想用空载质粒做阴性对照，转化子的筛选是用菌落PCR来做的吧，若以已经提好的空质粒为模板能扩出来与你基因大小相同的序列，若带型清晰的话，污染的可能性非常的大。
2 ...

P出来的条带还是很清楚的，每次做菌落PCR和提质粒都能P出来，难道是每次都污染了吗？第二个建议是不加模板去P吗