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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)

[求助] 连接产物化转提质粒浓度太低, 将质粒做化转,挑单菌落再提质粒浓度就变大了 已有6人参与

片段克隆到PQE30载体上后化转,菌落PCR验证正确,酶切正确,但是质粒浓度太低,后来我就把提出来的质粒做一个化转,挑单菌落再提质粒浓度就变大了,这是什么原因呢?
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 404160169 at 2015-05-06 14:04:11
你的宿主细胞是什么,这个现象确实很奇怪。

DH5a,因为之前做了三次连接,都是酶切验证都正确,只是质粒浓度很低,所以没办法我只好这么做了,然后今天质粒就变亮了。只是我还没有酶切验证,等酶切验证了就能说明质粒就是之前的了。只是这种情况真的太奇怪了。
7楼2015-05-06 14:20:11
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-05-06 13:01:21
这是很正常的。已经是不一样的质粒了。
2楼2015-05-06 11:30:55
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浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
潇潇溪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-06 19:29:04
宿主改变了,应该是有这种可能的
3楼2015-05-06 13:30:54
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-06 11:30:55
这是很正常的。已经是不一样的质粒了。

还没有酶切验证,等酶切验证结果出来就知道是不是改变了
4楼2015-05-06 14:03:55
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