应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母电转时质粒浓度到底多少最合适？？
111/2返回列表12下一页
查看: 6336  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cosmoslight

金虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母电转时质粒浓度到底多少最合适？？

准备做毕赤酵母电转化，看到说明书里说在制备好的80微升感受态中加入不超过10微升的线性化质粒，同时要求总量为5-10微克，有点凌乱了，质粒浓度按照说明书要求最低也要500ng/微升，这个浓度一是纯化回收后很难达到(我纯化后质粒浓度的一般在50-200ng/微升之间，很少超过300)，二是真的需要这么高浓度吗？如果是的话，各位有没有提高质粒回收浓度的好办法？


盼指点，财力有限，只能悬赏10个大钱，不要介意啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-10 09:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cosmoslight: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-08-25 13:57:04
你可以吧你的质粒浓度用3M醋酸钠和冷冻无水乙醇浓缩下
赞一下(2人) 回复此楼
爱拼才会赢
5楼2013-07-08 21:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒的浓度没有必要这么高，就是按照普通的质粒回收试剂盒回收的质粒，经过酶切后再用胶回收试剂盒回收或者醇沉，然后电转，完全OK
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-08-22 16:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
解决了，尽量浓缩下就好了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-10-19 19:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
刚才又看到一篇文献，说质粒浓度超过150ng/微升后，转化效率下降，真的凌乱了
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-10 09:18:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
555555555555，没人理啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-10 14:37:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
好冷清啊
回复此楼
4楼2013-05-13 14:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqi88315

金虫 (小有名气)
请问一下楼主，你们电转化仪多少钱？
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-01 15:28:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乐云蓝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaopeiliang at 2013-08-22 16:26:14
质粒的浓度没有必要这么高，就是按照普通的质粒回收试剂盒回收的质粒，经过酶切后再用胶回收试剂盒回收或者醇沉，然后电转，完全OK

麻烦问下：之前MD上长了很多克隆子，G418筛选到2mg/ml，但是提基因组扩RCR 一条目的带都没有，后续又 按照invrtrogen说明书上做了4次电转，一个菌都没长  百思不得其解，盼指导，谢谢
赞一下 回复此楼
能变的只能是自己
8楼2014-09-17 10:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chs4502

金虫 (小有名气)
请问楼主的问题解决了么？我也在做电转，为质粒浓度的事情头疼呢。
赞一下 回复此楼
9楼2015-10-19 15:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cosmoslight 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:42 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:39 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:32 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:08 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:05 by XgCC8uTcwILl
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:53 by XgCC8uTcwILl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:50 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 6/300 2026-09-27 05:42 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 5/250 2026-09-25 11:19 by yhq9807
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 7/350 2026-09-25 11:18 by yhq9807
[硕博家园] 上海工程技术大学 激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生 +4 oxidpl 2026-09-20 6/300 2026-09-24 20:40 by oxidpl
[教师之家] 课题组招2027级博士 上海工程技术大学 激光智能制造方向 +4 oxidpl 2026-09-20 6/300 2026-09-24 20:37 by oxidpl
[基金申请] 师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？ +4 13108017953 2026-09-21 4/200 2026-09-24 10:06 by kudofaye
[有机交流] 有机合成以后会不会被AI改变？做科研的虫友怎么看 +5 zapen 2026-09-20 8/400 2026-09-23 17:21 by tianxiaoxian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭