应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母电转时质粒浓度到底多少最合适？？
111/2返回列表12下一页
查看: 5657  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cosmoslight

金虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母电转时质粒浓度到底多少最合适？？

准备做毕赤酵母电转化，看到说明书里说在制备好的80微升感受态中加入不超过10微升的线性化质粒，同时要求总量为5-10微克，有点凌乱了，质粒浓度按照说明书要求最低也要500ng/微升，这个浓度一是纯化回收后很难达到(我纯化后质粒浓度的一般在50-200ng/微升之间，很少超过300)，二是真的需要这么高浓度吗？如果是的话，各位有没有提高质粒回收浓度的好办法？


盼指点，财力有限，只能悬赏10个大钱，不要介意啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-10 09:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cosmoslight: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-08-25 13:57:04
你可以吧你的质粒浓度用3M醋酸钠和冷冻无水乙醇浓缩下
赞一下(2人) 回复此楼
爱拼才会赢
5楼2013-07-08 21:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒的浓度没有必要这么高，就是按照普通的质粒回收试剂盒回收的质粒，经过酶切后再用胶回收试剂盒回收或者醇沉，然后电转，完全OK
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-08-22 16:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
解决了，尽量浓缩下就好了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-10-19 19:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
刚才又看到一篇文献，说质粒浓度超过150ng/微升后，转化效率下降，真的凌乱了
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-10 09:18:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
555555555555，没人理啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-10 14:37:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmoslight

金虫 (小有名气)
好冷清啊
回复此楼
4楼2013-05-13 14:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqi88315

金虫 (小有名气)
请问一下楼主，你们电转化仪多少钱？
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-01 15:28:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乐云蓝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaopeiliang at 2013-08-22 16:26:14
质粒的浓度没有必要这么高，就是按照普通的质粒回收试剂盒回收的质粒，经过酶切后再用胶回收试剂盒回收或者醇沉，然后电转，完全OK

麻烦问下：之前MD上长了很多克隆子，G418筛选到2mg/ml，但是提基因组扩RCR 一条目的带都没有，后续又 按照invrtrogen说明书上做了4次电转，一个菌都没长  百思不得其解，盼指导，谢谢
赞一下 回复此楼
能变的只能是自己
8楼2014-09-17 10:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chs4502

金虫 (小有名气)
请问楼主的问题解决了么？我也在做电转，为质粒浓度的事情头疼呢。
赞一下 回复此楼
9楼2015-10-19 15:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cosmoslight 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +12 不知道叫什么！ 2026-03-15 14/700 2026-03-16 16:45 by 我的船我的海
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭