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潇潇溪

新虫 (初入文坛)

[求助] 连接产物化转提质粒浓度太低， 将质粒做化转，挑单菌落再提质粒浓度就变大了 已有6人参与

片段克隆到PQE30载体上后化转，菌落PCR验证正确，酶切正确，但是质粒浓度太低，后来我就把提出来的质粒做一个化转，挑单菌落再提质粒浓度就变大了，这是什么原因呢？
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1楼 2015-05-06 11:13:40
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-06 13:01:21
这是很正常的。已经是不一样的质粒了。
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2楼2015-05-06 11:30:55
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浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
潇潇溪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-06 19:29:04
宿主改变了，应该是有这种可能的
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3楼2015-05-06 13:30:54
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-06 11:30:55
这是很正常的。已经是不一样的质粒了。

还没有酶切验证，等酶切验证结果出来就知道是不是改变了
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4楼2015-05-06 14:03:55
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404160169

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的宿主细胞是什么，这个现象确实很奇怪。
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5楼2015-05-06 14:04:11
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 浅语8905 at 2015-05-06 13:30:54
宿主改变了，应该是有这种可能的

同样是DH5a,没变过
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6楼2015-05-06 14:05:06
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潇潇溪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 404160169 at 2015-05-06 14:04:11
你的宿主细胞是什么，这个现象确实很奇怪。

DH5a,因为之前做了三次连接，都是酶切验证都正确，只是质粒浓度很低，所以没办法我只好这么做了，然后今天质粒就变亮了。只是我还没有酶切验证，等酶切验证了就能说明质粒就是之前的了。只是这种情况真的太奇怪了。
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7楼2015-05-06 14:20:11
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wuyao0513

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目测应该出在提质粒的方法上
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8楼2015-05-07 14:45:46
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2015-05-09 12:05:38
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十口木水

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问能跟你药店pQE30质粒么，谢谢，我的邮箱ryder_alone@foxmail.com
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10楼2016-07-18 10:56:03
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