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chenxiang29

银虫 (正式写手)

[求助] 摇菌小提质粒的氨苄浓度问题

如题,摇菌时加了不到一个菌落,细菌里面有抗氨苄质粒,若氨苄终浓度为100微克每毫升的话,菌会不会不容易生长或是被杀灭呢?还是不加氨苄直接摇菌提质粒呢?各位大侠请赐教

[ Last edited by chenxiang29 on 2012-11-5 at 16:46 ]
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smile to the world
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tangyuntao

铜虫 (小有名气)

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加不到一个菌落是没有问题的,不过摇菌的时间要控制到指数期,貌似是12-16h,菌量是够的,氨苄的浓度100ug/ml,分子克隆讲的,加了是为了抑制其他杂菌生长吧,话说你的菌是有抗氨苄的基因吧。

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博学而笃志,切问而近思。
6楼2012-11-06 11:26:16
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475502411

铜虫 (著名写手)

一定要加抗生素的,Amp的浓度至少要50
如果没有抗性压力,质粒很容易丢失的,因为质粒不是本身带的,不稳定
另外,也很容易污染的,你要是做表达的话,污染就不好了
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
7楼2012-11-06 11:33:00
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普通回帖

guoyanfei

金虫 (小有名气)

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100ug/ml,这个浓度时可以的,一定要加氨苄摇菌,不加抗生素的话会然杂菌
2楼2012-11-05 16:53:19
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changyi_23

金虫 (小有名气)

一定要交氨苄呢 我们实验室有加75μg/ml,也有加100μg/ml的 应该都没有问题的
3楼2012-11-05 18:17:02
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messi1910

铜虫 (初入文坛)

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氨苄的浓度50-100ug/ml都是可以的。
4楼2012-11-05 18:20:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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必须加氨苄,否则在无抗生素压力下,质粒会随着细菌分裂稀释而最终丢失。100ug/ml可以用。
5楼2012-11-06 11:10:39
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)

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标准量Amp为100ug/ml,必须按这个来
不是風動,亦非幡動,仁者心動
8楼2012-11-06 12:00:51
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wxlzzzz

新虫 (初入文坛)

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一定要有抗生素,氨苄100 μg/μL没问题,抗生素选择压力可以调整。我们实验室有50-100 μg/μL之间。
你做了什么,什么都没做。
9楼2012-11-06 14:09:18
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要加抗生素再摇菌的,这样才能筛选出带抗性的菌种
万物皆有毒,只要剂量足
10楼2012-11-06 14:16:10
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