| 查看: 2268 | 回复: 5 | ||
HAYDEN110银虫 (小有名气)
|
[求助]
紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？ 已有1人参与
|
需要用到的质粒大小是6.9k，是从另一个质粒上（大小为8.1k）用BglII和PstI双酶切后切胶回收的。我的目的片段大小是1.2k，是从pUC18上用BglII和PstI双酶切后切胶回收回来的，但是我用回收后的质粒和目的片段连接转化后发现提出的质粒乱七八糟，用BglII和PstI酶切验证也没有发现我的质粒大小和目的片段大小，切下来的片段也是乱七八糟。怎么办 切胶回收的质粒和目的片段.jpg  转化后提取的质粒，marker后面第一个为对照质粒（阳性转化子应该和对照质粒一样大）.jpg  酶切验证的质粒电泳图.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有268人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，酶切之后，非但是没有产物，而且连原本的质粒也没跑出来
已经有6人回复
- 细菌质粒提取浓度太低求助
已经有29人回复
- 胶回收产物连入克隆载体进行转化，结果第二天没有菌落长出。怎么回事儿？
已经有5人回复
- pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
已经有6人回复
- 连接转化假阳性提不出来质粒吗？
已经有8人回复
- 质粒与片段的连接
已经有9人回复
- 目的片段+pPIC9K载体转化大肠杆菌DH5a后提取质粒失败
已经有13人回复
- 克隆时做酶切，只切载体还是连要插入载体的片段也要酶切呢？
已经有7人回复
- 急!要连表达载体的目的片段可以是PCR后回收的产物吗？已经连中间载体验证过了
已经有3人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？
已经有13人回复
- 质粒构建时连接的片段总是反方向，求助！
已经有7人回复
- 【求助/交流】连到pGEM-T载体上的PCR回收产物，提质粒后还需要做酶切验证吗？
已经有13人回复
- 【求助/交流】质粒回收、连接时遇到的问题，急求！
已经有8人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】质粒pPICZA酶切问题
已经有5人回复
 |
2楼2014-05-20 01:31:14
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-05-20 11:54:33
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
4楼2014-06-13 15:07:37
5楼2014-06-16 10:31:38
HAYDEN110
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 608.9
- 散金: 5
- 帖子: 229
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 2607333
- 注册: 2013-08-20
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2014-08-17 12:43:22
