24小时热门版块排行榜    

查看: 2515  |  回复: 5

HAYDEN110

银虫 (小有名气)

[求助] 紧急求助!!用切胶回收后的质粒和片段做连接,转化,最后提取出的质粒乱七八糟?? 已有1人参与

需要用到的质粒大小是6.9k,是从另一个质粒上(大小为8.1k)用BglII和PstI双酶切后切胶回收的。我的目的片段大小是1.2k,是从pUC18上用BglII和PstI双酶切后切胶回收回来的,但是我用回收后的质粒和目的片段连接转化后发现提出的质粒乱七八糟,用BglII和PstI酶切验证也没有发现我的质粒大小和目的片段大小,切下来的片段也是乱七八糟。怎么办

紧急求助!!用切胶回收后的质粒和片段做连接,转化,最后提取出的质粒乱七八糟??
切胶回收的质粒和目的片段.jpg


紧急求助!!用切胶回收后的质粒和片段做连接,转化,最后提取出的质粒乱七八糟??-1
转化后提取的质粒,marker后面第一个为对照质粒(阳性转化子应该和对照质粒一样大).jpg


紧急求助!!用切胶回收后的质粒和片段做连接,转化,最后提取出的质粒乱七八糟??-2
酶切验证的质粒电泳图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HAYDEN110

银虫 (小有名气)

2楼2014-05-20 01:31:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

我的也是这个样子   求大牛
3楼2014-05-20 11:54:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)

请问,,质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》???  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗??嘻嘻嘻谢谢谢谢
12
4楼2014-06-13 15:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-13 15:07:37
请问,,质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》???  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗??嘻嘻嘻谢谢谢谢

我是碱裂的方法提的,酶切啊测序啊都没问题的。
5楼2014-06-16 10:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HAYDEN110

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-13 15:07:37
请问,,质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》???  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗??嘻嘻嘻谢谢谢谢

我们一般都是用碱法

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-08-17 12:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 HAYDEN110 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见