应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？
51/1返回列表
查看: 2206  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

HAYDEN110

银虫 (小有名气)

[求助] 紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？ 已有1人参与

需要用到的质粒大小是6.9k，是从另一个质粒上（大小为8.1k）用BglII和PstI双酶切后切胶回收的。我的目的片段大小是1.2k，是从pUC18上用BglII和PstI双酶切后切胶回收回来的，但是我用回收后的质粒和目的片段连接转化后发现提出的质粒乱七八糟，用BglII和PstI酶切验证也没有发现我的质粒大小和目的片段大小，切下来的片段也是乱七八糟。怎么办

紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？
切胶回收的质粒和目的片段.jpg


紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？-1
转化后提取的质粒，marker后面第一个为对照质粒（阳性转化子应该和对照质粒一样大）.jpg


紧急求助！！用切胶回收后的质粒和片段做连接，转化，最后提取出的质粒乱七八糟？？-2
酶切验证的质粒电泳图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-20 01:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
我的也是这个样子   求大牛
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-20 11:54:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

永峰1230

铜虫 (小有名气)
请问，，质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》？？？  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗？？嘻嘻嘻谢谢谢谢
赞一下 回复此楼
12
4楼2014-06-13 15:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-13 15:07:37
请问，，质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》？？？  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗？？嘻嘻嘻谢谢谢谢

我是碱裂的方法提的，酶切啊测序啊都没问题的。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-06-16 10:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HAYDEN110

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-13 15:07:37
请问，，质粒 使用 试剂盒 还是 什么 提取的呢》？？？  我用 碱法提取 法 提取后 的质粒  可以 直接 酶切吗？？嘻嘻嘻谢谢谢谢

我们一般都是用碱法

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-17 12:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭