版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (5528)
>考研 (1700)
>导师招生 (1511)
>文献求助 (308)
>虫友互识 (206)
>硕博家园 (124)
>考博 (116)
>博后之家 (115)
>招聘信息布告栏 (94)
>休闲灌水 (86)
>论文投稿 (77)
>基金申请 (57)
>找工作 (37)
>高分子 (35)
>绿色求助(高悬赏) (33)
>公派出国 (29)

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilylil

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 39.7
帖子: 50
在线: 57.5小时
虫号: 3013961
注册: 2014-03-03
性别: MM
专业: 兽医免疫学

[求助] 双酶切问题，急~ 已有18人参与

本人现在用Not I 和EcoR I 双酶切，目的片段60bp,载体是PUC57总是显示一条带，用酶各自单切都可切开，用的是Takara的酶。
反应体系1μl Not I
            1μl EcoR I
            4μl 0.1% BSA
            4μl 10×H
            25μl 质粒（≤1μg）
            5μl 水
37℃，3h
现在实验就卡在这了，很急请大家多多指导

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

双酶切怎么操作才能完全彻底呢！已经有27人回复
southern blot酶切基因组问题已经有6人回复
双酶切得到的500bp的片段回收效果不好，是怎么个情况？已经有8人回复
T-RFLP中回收及酶切相关问题已经有17人回复
单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？已经有7人回复
质粒上的两个酶切位点紧挨着，双酶切能否切开已经有6人回复
双酶切总是切不开。。。有没有人用过NEB的NotI这个酶？已经有36人回复
双酶切图片，不知道切没切开，求指教。已经有9人回复
关于双酶切的酶的失活问题已经有6人回复
质粒双酶切遇到点问题，求指教。已经有12人回复
双酶切问题，跪求指导啊已经有5人回复
XhoI和BamHI双酶切问题已经有16人回复
如何做分步双酶切已经有6人回复
NdeI,BamHI双酶切已经有8人回复
纠结的分子实验，双酶切连不上，求助已经有14人回复
关于双酶切后回收的问题已经有12人回复
有关NEB内切酶NdeI和XhoI的双酶切问题已经有6人回复
SnabΙ和NotΙ这两种酶的双酶切反应已经有6人回复
小片段双酶切求助，急急急已经有18人回复
连接产物双酶切已经有11人回复
Hind111 与 Not1双酶切请教急急急！！！已经有13人回复
求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！已经有7人回复
请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家已经有7人回复
双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点已经有52人回复
【求助/交流】双酶切的问题哦已经有18人回复

1楼 2015-05-04 16:27:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

632362481

铜虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 40.5
帖子: 53
在线: 48.8小时
虫号: 3750938
注册: 2015-03-19
性别: GG
专业: 病原真菌学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

60bp片段太小了，建议做胶的时候密度大点。

赞一下

回复此楼

。。。

8楼2015-05-05 11:41:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 22 个回答

781055707

木虫 (著名写手)

应助: 291 (大学生)
金币: 3118.2
散金: 46
红花: 19
帖子: 2030
在线: 579.3小时
虫号: 3046113
注册: 2014-03-13
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

我切过80BP的，跑电泳看不出来，但质粒确实切开了，后来也连上了。

赞一下

回复此楼

采菊东篱下，悠然见南山。

2楼2015-05-04 16:41:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

专家经验: +106
应助: 108 (高中生)
贵宾: 2.351
金币: 33457.9
散金: 3850
红花: 153
沙发: 8
帖子: 5316
在线: 1310.2小时
虫号: 2234819
注册: 2013-01-11
性别: GG
专业: 药物毒理
管辖: 文学芳草园

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-04 23:20:02

可以尝试一下高浓度的胶，不过中间片段只有60bp的话很难看出来……可以用没有切过的载体做对照。祝顺利！

赞一下(1人)

回复此楼

他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！

3楼2015-05-04 16:53:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

沉默的独角兽

金虫 (正式写手)

应助: 14 (小学生)
金币: 1414.2
散金: 2442
红花: 7
帖子: 687
在线: 131.4小时
虫号: 1383389
注册: 2011-08-29
性别: GG
专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

会不会是两个酶切位点靠得太近？

赞一下

回复此楼

4楼2015-05-04 18:04:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 22 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

[考研] 求调剂 +3	零八# 2026-03-27	3/150	2026-03-27 17:08 by Delta2012
[考研] 340求调剂 +4	jhx777 2026-03-27	4/200	2026-03-27 16:50 by sanrepian
[考研] 一志愿西北大学总分282 英语一62 求调剂 +7	18419759900 2026-03-25	8/400	2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 339求调剂 +4	烤麦芽 2026-03-27	5/250	2026-03-27 13:23 by 752105528
[考研] 312求调剂 +9	上岸吧ZJY 2026-03-22	13/650	2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 324求调剂 +5	hanamiko 2026-03-26	5/250	2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 359求调剂 +4	王了个楠 2026-03-25	4/200	2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +8	匹克i 2026-03-23	8/400	2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +4	wysyjs25 2026-03-21	4/200	2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 081700 调剂 267分 +11	迷人的哈哈 2026-03-23	11/550	2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9	Mr. Z 2026-03-25	9/450	2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 311求调剂 +3	冬十三 2026-03-24	3/150	2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3	akrrain 2026-03-24	3/150	2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3	考研调剂lxh 2026-03-24	3/150	2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3	desto 2026-03-24	3/150	2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 336求调剂 +4	收到VS 2026-03-20	4/200	2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4	LHHL66 2026-03-23	4/200	2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 生物学调剂 +5	Surekei 2026-03-21	5/250	2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3	收到VS 2026-03-21	3/150	2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7	墨墨漠 2026-03-20	7/350	2026-03-21 16:36 by barlinike