24小时热门版块排行榜    

查看: 2511  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子

[求助] 200bp DNA PCR 已有2人参与

最近200bp DNA PCR一直都是这样,以前挺好的,突然就一直是弥散了,不知道哪里出差了。请各位老师指点一下。感谢老师们帮忙呀!

200bp DNA PCR
clip_image002.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

伟大是熬出来的!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子

引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:13:25
阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带,用来验证引物以及整个体系有无问题!
阴性对照一般是整个体系中不加模板,用水补齐,这样正常情况下是p不出条带的!
如果你有很大的把握认为引物没问题,我建议你用tak ...

我用的就是这种酶,我现在的退火温度是56℃
伟大是熬出来的!
7楼2015-04-15 14:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议重新合成引物再pcr方能解决你的问题,每次pcr要加上阳性和阴性对照!

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-04-14 21:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 21:40:16
建议重新合成引物再pcr方能解决你的问题,每次pcr要加上阳性和阴性对照!

为什么你觉得是引物的问题呢?还有我们做的时候一直是以marker做对照的,你说的阳性和阴性对照是什么意思?我是初学者,请教请教
伟大是熬出来的!
3楼2015-04-14 21:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-15 22:08:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王叶kaoyan at 2015-04-14 21:51:34
为什么你觉得是引物的问题呢?还有我们做的时候一直是以marker做对照的,你说的阳性和阴性对照是什么意思?我是初学者,请教请教...

阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带,用来验证引物以及整个体系有无问题!
阴性对照一般是整个体系中不加模板,用水补齐,这样正常情况下是p不出条带的!
如果你有很大的把握认为引物没问题,我建议你用takara LA Taq酶进行pcr。
提高下你的退火温度,模板要加适量。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-04-14 23:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +5 Tide man 2026-08-11 5/250 2026-08-12 09:24 by kangban
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +18 Lanmanbaby 2026-08-09 30/1500 2026-08-12 09:10 by xandria
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见