应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 多重PCR与普通PCR反应的差别主要是什么
101/1返回列表
查看: 7032  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

随心凯

新虫 (初入文坛)

[求助] 多重PCR与普通PCR反应的差别主要是什么 已有2人参与

多重PCR与普通PCR反应的差别主要是什么？求详细解答。以及多重PCR一般用的酶有哪些？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-04 13:43:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随心凯: 金币+2 2015-01-07 16:08:39
多对引物同时扩增，其它没差别
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-01-07 08:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随心凯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2015-01-07 08:43:41
多对引物同时扩增，其它没差别

谢谢！希望得到全面深入的解释。
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-07 16:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
随心凯: 金币+3, ★有帮助 2015-01-09 08:38:43
普通PCR就是一对引物(一对引物是两条单链核苷酸)，在PCR反应体系中，引物，模板，dNTP，酶，水就这几种主要的成分，进行普通PCR。
多重PCR就是不止一对引物，有两对引物以上的PCR才叫做多重PCR。为帮助你理解举个例子，在PCR时模板的长度是一定的，比如说模板是200bp的长度，在普通PCR时我们想要扩增的结果就是得到：这200bp模板扩增出来的双链，在经过25-30个循环之后，扩增出许多的200bp长度的模板链。但 如果现在我们要扩增1000bP的模板，如下序列举例
ATCGCTAAA  TTGGCTTT  CCGTTAC  AAAGTAA GTTATCC  GTAAGCTT
      1                 2              3            4            5             6
比如说以上序列（当然序列式我自己随机写的哈）在PCR时我们想要扩增1、3、5序列但是不想扩增2、4、6序列，这时候扩增1、3、5序列得设计三对引物才能扩增呢，这就叫做多重PCR（好理解不）所以说：需要两对以上引物的PCR才叫做多重PCR。
至于多重PCR用酶，那不要用普通的Taq酶，普通Taq酶特异性不好，易产生错配，尤其是多重PCR中极易产生错配，我扩增人类基因组6个区域的时候用的是热启动酶，能够精准扩增，效果很好。多重PCR酶还是选择热启动酶较好，普通Taq酶效果差，高保真酶又没必要使用，长片段酶也酶必要。
希望对你有所帮助哦，谢谢。如果您对酶还有什么问题，还可以咨询我哦。
赞一下(3人) 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-08 10:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随心凯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-08 10:24:27
普通PCR就是一对引物(一对引物是两条单链核苷酸)，在PCR反应体系中，引物，模板，dNTP，酶，水就这几种主要的成分，进行普通PCR。
多重PCR就是不止一对引物，有两对引物以上的PCR才叫做多重PCR。为帮助你理解举个例 ...

我是做二代测序，多重PCR有上百对引物，最近一直查多重PCR的酶及其具体信息，你有什么推荐吗？
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-09 08:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
5楼: Originally posted by 随心凯 at 2015-01-09 08:42:17
我是做二代测序，多重PCR有上百对引物，最近一直查多重PCR的酶及其具体信息，你有什么推荐吗？...

上百对引物的，目前还没有做过~，我使用的是Relia热启动Taq酶，挑战过一百多对引物的实验，效果说的过去吧（毕竟实验的成功与否有各种因素有关 是吧）。
不过life公司的有一种酶效果还是可以的，但是就是贵啊。还有一点就是既然你用的是上百对的引物，模板链应该是很长的，可以试一下长片段扩增的酶（只是推荐 呵呵）但是长片段扩增的酶没有热启动 还是会有错配尤其对引物来说，引物自身会错配，所以还是选择热启动Taq酶较好。
希望对你有所帮助
赞一下(2人) 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-01-09 09:50:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Somuch2learn

新虫 (初入文坛)
我也在做多重PCR，做了挺长时间了，也用过不少酶，推荐的是Biotium的Cheetah Taq 热启动酶，我做的是6重。而且我做多重定量PCR也是用这个酶配的反应液。
赞一下 回复此楼
7楼2016-01-29 17:18:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Somuch2learn

新虫 (初入文坛)
留下QQ吧，以后多多交流373397476 西北农林科技大
赞一下 回复此楼
8楼2016-01-29 17:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Somuch2learn at 2016-01-29 17:19:55
留下QQ吧，以后多多交流373397476 西北农林科技大

做个标记，有时间再向你多多指教。
赞一下 回复此楼
9楼2016-03-11 17:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木虫爱学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-08 10:24:27
普通PCR就是一对引物(一对引物是两条单链核苷酸)，在PCR反应体系中，引物，模板，dNTP，酶，水就这几种主要的成分，进行普通PCR。
多重PCR就是不止一对引物，有两对引物以上的PCR才叫做多重PCR。为帮助你理解举个例 ...

请问下你们的退火延伸温度多少呀

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-05-07 22:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 随心凯 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +4 脱颖而出 2026-03-16 9/450 2026-03-18 14:13 by 脱颖而出
[考研] 286求调剂 +4 lemonzzn 2026-03-16 7/350 2026-03-18 14:11 by 007_lilei
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 302求调剂 +9 负心者当诛 2026-03-11 9/450 2026-03-17 17:13 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭