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多重PCR与普通PCR反应的差别主要是什么 已有2人参与
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| 多重PCR与普通PCR反应的差别主要是什么？求详细解答。以及多重PCR一般用的酶有哪些？ |
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muchong5577
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【答案】应助回帖
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随心凯: 金币+3, ★有帮助 2015-01-09 08:38:43
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普通PCR就是一对引物(一对引物是两条单链核苷酸)，在PCR反应体系中，引物，模板，dNTP，酶，水就这几种主要的成分，进行普通PCR。 多重PCR就是不止一对引物，有两对引物以上的PCR才叫做多重PCR。为帮助你理解举个例子，在PCR时模板的长度是一定的，比如说模板是200bp的长度，在普通PCR时我们想要扩增的结果就是得到：这200bp模板扩增出来的双链，在经过25-30个循环之后，扩增出许多的200bp长度的模板链。但 如果现在我们要扩增1000bP的模板，如下序列举例 ATCGCTAAA TTGGCTTT CCGTTAC AAAGTAA GTTATCC GTAAGCTT 1 2 3 4 5 6 比如说以上序列（当然序列式我自己随机写的哈）在PCR时我们想要扩增1、3、5序列但是不想扩增2、4、6序列，这时候扩增1、3、5序列得设计三对引物才能扩增呢，这就叫做多重PCR（好理解不）所以说：需要两对以上引物的PCR才叫做多重PCR。 至于多重PCR用酶，那不要用普通的Taq酶，普通Taq酶特异性不好，易产生错配，尤其是多重PCR中极易产生错配，我扩增人类基因组6个区域的时候用的是热启动酶，能够精准扩增，效果很好。多重PCR酶还是选择热启动酶较好，普通Taq酶效果差，高保真酶又没必要使用，长片段酶也酶必要。 希望对你有所帮助哦，谢谢。如果您对酶还有什么问题，还可以咨询我哦。 |
4楼2015-01-08 10:24:27
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