应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 200bp DNA PCR
111/2返回列表12下一页
查看: 2475  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子

[求助] 200bp DNA PCR 已有2人参与

最近200bp DNA PCR一直都是这样，以前挺好的，突然就一直是弥散了，不知道哪里出差了。请各位老师指点一下。感谢老师们帮忙呀！

200bp DNA PCR
clip_image002.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
伟大是熬出来的！
1楼 2015-04-14 21:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议重新合成引物再pcr方能解决你的问题，每次pcr要加上阳性和阴性对照！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

王叶kaoyan
2楼2015-04-14 21:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 21:40:16
建议重新合成引物再pcr方能解决你的问题，每次pcr要加上阳性和阴性对照！

为什么你觉得是引物的问题呢？还有我们做的时候一直是以marker做对照的，你说的阳性和阴性对照是什么意思？我是初学者，请教请教
赞一下 回复此楼
伟大是熬出来的！
3楼2015-04-14 21:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-15 22:08:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王叶kaoyan at 2015-04-14 21:51:34
为什么你觉得是引物的问题呢？还有我们做的时候一直是以marker做对照的，你说的阳性和阴性对照是什么意思？我是初学者，请教请教...

阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带，用来验证引物以及整个体系有无问题！
阴性对照一般是整个体系中不加模板，用水补齐，这样正常情况下是p不出条带的！
如果你有很大的把握认为引物没问题，我建议你用takara LA Taq酶进行pcr。
提高下你的退火温度，模板要加适量。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-14 23:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 王叶kaoyan at 2015-04-14 21:51:34
为什么你觉得是引物的问题呢？还有我们做的时候一直是以marker做对照的，你说的阳性和阴性对照是什么意思？我是初学者，请教请教...

从你的电泳图上看，你配制的胶浓度小于等于1%,marker条带跑的也不好，电压大了不过还是你的胶没有煮完全溶解。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-04-14 23:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:13:25
阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带，用来验证引物以及整个体系有无问题！
阴性对照一般是整个体系中不加模板，用水补齐，这样正常情况下是p不出条带的！
如果你有很大的把握认为引物没问题，我建议你用tak ...

我们模板都是加1ul的
赞一下 回复此楼
伟大是熬出来的！
6楼2015-04-15 09:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:13:25
阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带，用来验证引物以及整个体系有无问题！
阴性对照一般是整个体系中不加模板，用水补齐，这样正常情况下是p不出条带的！
如果你有很大的把握认为引物没问题，我建议你用tak ...

我用的就是这种酶，我现在的退火温度是56℃
赞一下 回复此楼
伟大是熬出来的！
7楼2015-04-15 14:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子
引用回帖:
5楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:18:41
从你的电泳图上看，你配制的胶浓度小于等于1%,marker条带跑的也不好，电压大了不过还是你的胶没有煮完全溶解。
...

我的胶是用微波炉煮的，应该完全溶解了
赞一下 回复此楼
伟大是熬出来的！
8楼2015-04-15 14:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王叶kaoyan

金虫 (初入文坛)

叶子
引用回帖:
5楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:18:41
从你的电泳图上看，你配制的胶浓度小于等于1%,marker条带跑的也不好，电压大了不过还是你的胶没有煮完全溶解。
...

我的胶是用微波炉煮的，应该完全溶解了
赞一下 回复此楼
伟大是熬出来的！
9楼2015-04-15 14:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenma521 at 2015-04-14 23:13:25
阳性对照指的是在pcr体系中肯定能p出条带，用来验证引物以及整个体系有无问题！
阴性对照一般是整个体系中不加模板，用水补齐，这样正常情况下是p不出条带的！
如果你有很大的把握认为引物没问题，我建议你用tak ...

takara LA Taq酶？.....,她才200bp而已
一般的酶就行了，最多也就用个热启动酶，哪用得着LA Taq 聚合酶
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
10楼2015-04-15 16:42:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王叶kaoyan 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭