24小时热门版块排行榜

返回列表

肖thest

木虫 (小有名气)

神级

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2655.7
散金: 5
帖子: 209
在线: 52.9小时
虫号: 1343978
注册: 2011-07-12
专业: 味觉、口颌面疼痛、咬合及

[求助] 求助引物设计：前前后后三次都有问题，请大神帮帮忙…………感激不尽已有2人参与

共1067bp，粗线是我需要看的基因区域，想设计一对引物，普通PCR后测序（单向测，所以上游或者下游引物离目标区域起码60bp），用primer或者NCBI primer blast设计了三次，每次引物特异性较差或者退火温度摸不出来。
下面是我的序列：
TGAGACTTTT CCGTTGCCGC TGGGAGCCGG AGGCGCGGGG ACCTCTTGGC GCGACGCTGC
CCCGCGAGGA GGCAGGACTT GGGGACCCCA GACCGCCTCC CTTTGCCGCC GGGGACGCTT
GCTCCCTCCC TGCCCCCTAC ACGGCGTCCC TCAGGCGCCC CCATTCCGGA CCAGCCCTCG
GGAGTCGCCG ACCCGGCCTC CCGCAAAGAC TTTTCCCCAG ACCTCGGGCG CACCCCCTGC
ACGCCGCCTT CATCCCCGGC CTGTCTCCTG AGCCCCCGCG CATCCTAGAC CCTTTCTCCT
CCAGGAGACG GATCTCTCTC CGACCTGCCA CAGATCCCCT ATTCAAGACC ACCCACCTTC
TGGTACCAGA TCGCGCCCAT CTAGGTTATT TCCGTGGGAT ACTGAGACAC CCCCGGTCCA
AGCCTCCCCT CCACCACTGC GCCCTTCTCC CTGAGGACCT CAGCTTTCCC TCGAGGCCCT
CCTACCTTTT GCCGGGAGAC CCCCAGCCCC TGCAGGGGCG GGGCCTCCCC ACCACACCAG
CCCTGTTCGC GCTCTCGGCA GTGCCGGGGG GCGCCGCCTC CCCCATGCCG CCCTCCGGgc
tgcggctgct gcCgctgctgcta ccgctgctgt ggctactggt gctgACGCCT GGCCGGCCGG CCGCGGGACT
ATCCACCTGC AAGACTATCG ACATGGAGCT GGTGAAGCGG AAGCGCATCG AGGCCATCCG
CGGCCAGATC CTGTCCAAGC TGCGGCTCGC CAGCCCCCCG AGCCAGGGGG AGGTGCCGCC
CGGCCCGCTG CCCGAGGCCG TGCTCGCCCT GTACAACAGC ACCCGCGACC GGGTGGCCGG
GGAGAGTGCA GAACCGGAGC CCGAGCCTGA GGCCGACTAC TACGCCAAGG AGGTCACCCG
CGTGCTAATG GTGGAAACCC ACAACGGTGA GCTCGGAGGG GCAGGGGAGC CGGGAGGGGG
GCCCCCAGGG GGCGCCGGAG TGCCGGGGCC ACGGGTAGGA AGTGACTGGC AGAAGAAACT
GGCTGGAGGA AGAGGACACC CCGGGGCAAA GGGA

[ Last edited by 肖thest on 2013-12-22 at 13:43 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路已经有0人回复
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有188人回复
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景已经有0人回复
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析已经有0人回复
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析已经有1人回复
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

有谁知道四环素目的基因小于200bp的引物？或者谁能指导下怎么设计？不胜感激！已经有3人回复
【求助/交流】求助引物设计步骤已经有3人回复

thest

1楼 2013-12-22 13:42:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Dr.G

新虫 (初入文坛)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 61.8
帖子: 13
在线: 4.8小时
虫号: 2872883
注册: 2013-12-15
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

PCR仪可以梯度的话，建议梯度PCR试一下，试试能不能扩出你要的条带

赞一下(1人)

回复此楼

28楼2013-12-22 23:58:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

woshishui916

木虫 (著名写手)

应助: 15 (小学生)
金币: 8214
散金: 70
红花: 3
帖子: 1801
在线: 301.9小时
虫号: 335922
注册: 2007-03-31
性别: GG
专业: 植物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
肖thest: 金币+15, ★★★★★最佳答案, 很感激，很nice的人 2013-12-22 23:13:55
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 20:45:26

上游：AAGCCTCCCCTCCACCACTG
下游：CCGCAGCTTGGACAGGATCT
肯定能出来
出不来你再联系我

赞一下

回复此楼