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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助引物设计：前前后后三次都有问题，请大神帮帮忙…………感激不尽
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woshishui916

木虫 (著名写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 肖thest at 2013-12-22 20:36:32
好的，那我买GC高的buffer基本上没问题吧，您说的条件我们实验室很难，只有一台普通pcr仪器...

就是在普通的PCR仪器上可以实现的。
你用的什么PCR仪器呢？
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21楼2013-12-22 20:40:06
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肖thest

木虫 (小有名气)

神级
引用回帖:
21楼: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-22 20:40:06
就是在普通的PCR仪器上可以实现的。
你用的什么PCR仪器呢？...

以前最古老的红色的那种，不知道型号啊。我的意思是，如果您设计的可以用GC高的buffer我就直接这么搞，或者我的引物也可以的话。
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thest
22楼2013-12-22 20:42:02
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肖thest

木虫 (小有名气)

神级
引用回帖:
21楼: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-22 20:40:06
就是在普通的PCR仪器上可以实现的。
你用的什么PCR仪器呢？...

条件有点差，见谅啊
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thest
23楼2013-12-22 20:43:46
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woshishui916

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 肖thest at 2013-12-22 20:43:46
条件有点差，见谅啊...

没事
普通的PCR仪就可以，你目前用的肯定可以的
就是需要增加步骤而已；
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24楼2013-12-22 20:45:04
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肖thest

木虫 (小有名气)

神级
引用回帖:
24楼: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-22 20:45:04
没事
普通的PCR仪就可以，你目前用的肯定可以的
就是需要增加步骤而已；...

那我就先用我的引物按照您站内的步骤试试吧？
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thest
25楼2013-12-22 20:47:34
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woshishui916

木虫 (著名写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by 肖thest at 2013-12-22 20:47:34
那我就先用我的引物按照您站内的步骤试试吧？...

可以，如果还出不来，你给我消息就好了
这个片段要扩增多少个sample?
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26楼2013-12-22 20:59:44
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肖thest

木虫 (小有名气)

神级
引用回帖:
26楼: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-22 20:59:44
可以，如果还出不来，你给我消息就好了
这个片段要扩增多少个sample?...

200个sample啊，所以…………
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thest
27楼2013-12-22 21:00:33
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Dr.G

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR仪可以梯度的话，建议梯度PCR试一下，试试能不能扩出你要的条带
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28楼2013-12-22 23:58:07
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肖thest

木虫 (小有名气)

神级
引用回帖:
28楼: Originally posted by Dr.G at 2013-12-22 23:58:07
PCR仪可以梯度的话，建议梯度PCR试一下，试试能不能扩出你要的条带

谢谢，明天我会去试试，可能是目的序列GC含量的问题，GC含量太高了
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thest
29楼2013-12-23 00:10:01
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