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请分子生物学高手帮忙看看下面的PCR体系... 已有4人参与
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Each primer pair was used in 20 μl volume reactions containing 300 nM dNTPs (Eppendorf AG, Hamburg, Deutschland),1×DNA pol buffer (Biotools BandM labs S.A., Madrid, Spain), 3 mM MgCl2 (Biotools), 0.75 μ DNA polymerase (Biotools), 10 pmol each primer (depending on marker), and 10 ng of total DNA. 本人在用通用引物 LCO1498 and HCO2198 扩寄生蜂线粒体基因 coi ，无奈老是做不出来，想按照文献上别人的方法试试，可是体系怎么看不懂呢，括号后面的是生物公司还是某什么啊，我用的是TaKaRa 公司的酶( 5U/ μl )，10×PCR Buffer( with Mg2+ ) , dNTP Mixture（各 2.5 mM), 他们用的试剂可以在哪个公司订到吗？急！急！！急！！！ |
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18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
- MolEPI: 1
- 应助: 172 (高中生)
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- 散金: 170
- 红花: 16
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- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
| 普通的Taq DNA聚合酶可能不能达到扩增的效果，选酶还是很重要的http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html写的挺好的，呵呵，我们都是用热启动聚合酶，感觉很好，我现在也在找其他的酶，想尝试高保真酶，或是能进行长片段PCR的，你的这个体系看不出有什么问题啊，你应该把你的扩增结果发上来，出现什么问题了，也许那样解决会更好 |
8楼2015-04-07 11:21:23
感谢参与，应助指数 +1
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2楼2015-04-03 23:07:46
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3楼2015-04-03 23:08:42
4楼2015-04-06 20:35:21
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