应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物条件摸索时扩增条带很亮，具体扩条带会出现拖带现象。大神帮忙解答。
51/1返回列表
查看: 1850  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

load1

新虫 (小有名气)

[求助] 引物条件摸索时扩增条带很亮，具体扩条带会出现拖带现象。大神帮忙解答。 已有2人参与

实验已经反反复复很多次，结果竟然惊人的一致：引物条件摸索时候，发现条带很亮（10ul体系摸索）。但是具体扩增条带时（体系是50ul）会出现拖带现象。扩增酶是pfu。
   查找原因的时候，引物重新合成，质粒重新提取，结果如图。思索之后，引物后又添加10碱基，增强特异性，但是结果如初。
求大神解答。呜呜。。。。。

引物条件摸索时扩增条带很亮，具体扩条带会出现拖带现象。大神帮忙解答。
胶回收.jpg


引物条件摸索时扩增条带很亮，具体扩条带会出现拖带现象。大神帮忙解答。-1
退火温度条件摸索.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-31 09:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuejia174

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2015-03-31 10:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换个酶吧，建议使用热启动聚合酶，扩增还是很有保证的，一般的实验没有针对到一个碱基的不建议使用高保真酶
可以看看选择吧http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html 呵呵
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-03-31 10:19:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

load1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xuejia174 at 2015-03-31 10:15:46
加大模板量，把酶换一下

加大模版量后会产生拖带现象

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-03 14:03:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

load1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-31 10:19:34
换个酶吧，建议使用热启动聚合酶，扩增还是很有保证的，一般的实验没有针对到一个碱基的不建议使用高保真酶
可以看看选择吧http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html 呵呵

什么是没有针对到一个碱基

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-03 14:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 load1 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 06:53 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:43 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 3/150 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 03:59 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 5/250 2026-11-01 02:25 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-11-01 02:19 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 00:41 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 12/600 2026-11-01 00:15 by YXM1FDCSE8Bn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-10-31 17:12 by hKe7U1kad5Sg
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭