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引物条件摸索时扩增条带很亮，具体扩条带会出现拖带现象。大神帮忙解答。已有2人参与
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实验已经反反复复很多次，结果竟然惊人的一致：引物条件摸索时候，发现条带很亮（10ul体系摸索）。但是具体扩增条带时（体系是50ul）会出现拖带现象。扩增酶是pfu。 查找原因的时候，引物重新合成，质粒重新提取，结果如图。思索之后，引物后又添加10碱基，增强特异性，但是结果如初。 求大神解答。呜呜。。。。。  胶回收.jpg  退火温度条件摸索.jpg |
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2楼2015-03-31 10:15:46
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
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【答案】应助回帖
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换个酶吧，建议使用热启动聚合酶，扩增还是很有保证的，一般的实验没有针对到一个碱基的不建议使用高保真酶 可以看看选择吧http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html 呵呵  |
3楼2015-03-31 10:19:34
4楼2015-11-03 14:03:54
5楼2015-11-03 14:06:55