24小时热门版块排行榜    

查看: 850  |  回复: 2

duanruijing

金虫 (小有名气)

[求助] pcr目的条带不明显 已有1人参与

PCR之后,目的条带基本没有,是引物有问题还是什么原因?求高手指点。

pcr目的条带不明显
IMG_2179.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

摆正心态,多多学习
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kehope

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-27 11:35:26
能否说明下你用的cdna是怎么得到的?
目的蛋白序列,以及引物的序列信息。
你pcr的反应条件。
你上了这几个通道,每个通道是什么意思啊?marker又是怎么个顺序?250  500  750  1000  1500??
你想p出多大的条带?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-03-26 23:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanruijing

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kehope at 2015-03-26 23:31:59
能否说明下你用的cdna是怎么得到的?
目的蛋白序列,以及引物的序列信息。
你pcr的反应条件。
你上了这几个通道,每个通道是什么意思啊?marker又是怎么个顺序?250  500  750  1000  1500??
你想p出多大的条 ...

采用的CTAB法提取的DNA。我想做的是RAPD分析,引物都是通过看文献,选取多态性较好的再由引物公司设计的。RAPD-PCR扩增反应体系为20μL:2×Power Taq PCRMasterMix 9 μL,引物1μL,模板1μL,双蒸水补足到1μL。
PCR扩增程序:94℃预变性3min
      94℃变性1min        38℃退火45s
      72℃延伸1min        40个循环
      72℃延伸7min         4℃保存
引物的TM值一般是32℃,其实预想的结果是每个通道都能有多条清晰的条带。
摆正心态,多多学习
3楼2015-03-28 10:54:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 duanruijing 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见