24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 757  |  回复: 2

duanruijing

金虫 (小有名气)

[求助] pcr目的条带不明显 已有1人参与

PCR之后,目的条带基本没有,是引物有问题还是什么原因?求高手指点。

pcr目的条带不明显
IMG_2179.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

摆正心态,多多学习
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kehope

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-27 11:35:26
能否说明下你用的cdna是怎么得到的?
目的蛋白序列,以及引物的序列信息。
你pcr的反应条件。
你上了这几个通道,每个通道是什么意思啊?marker又是怎么个顺序?250  500  750  1000  1500??
你想p出多大的条带?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-03-26 23:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanruijing

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kehope at 2015-03-26 23:31:59
能否说明下你用的cdna是怎么得到的?
目的蛋白序列,以及引物的序列信息。
你pcr的反应条件。
你上了这几个通道,每个通道是什么意思啊?marker又是怎么个顺序?250  500  750  1000  1500??
你想p出多大的条 ...

采用的CTAB法提取的DNA。我想做的是RAPD分析,引物都是通过看文献,选取多态性较好的再由引物公司设计的。RAPD-PCR扩增反应体系为20μL:2×Power Taq PCRMasterMix 9 μL,引物1μL,模板1μL,双蒸水补足到1μL。
PCR扩增程序:94℃预变性3min
      94℃变性1min        38℃退火45s
      72℃延伸1min        40个循环
      72℃延伸7min         4℃保存
引物的TM值一般是32℃,其实预想的结果是每个通道都能有多条清晰的条带。
摆正心态,多多学习
3楼2015-03-28 10:54:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 duanruijing 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +4 王国帅 2026-04-10 4/200 2026-04-10 16:07 by jiajinhpu
[考研] 求调剂288 +5 ioodiiij 2026-04-10 7/350 2026-04-10 15:49 by ioodiiij
[考研] 求调剂 +16 熊二想上岸 2026-04-04 16/800 2026-04-10 11:24 by may_新宇
[考研] 301求调剂 +6 静静想想 2026-04-05 6/300 2026-04-10 09:15 by Delta2012
[考研] 求调剂 +15 张zic 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:12 by kangsm
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 269电子信息求调剂,可转专业 +9 独酌wl 2026-04-06 9/450 2026-04-09 20:55 by laoshidan
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 400分求调剂 +3 尴尬且挠头 2026-04-04 3/150 2026-04-04 08:41 by jp9609
信息提示
请填处理意见