24小时热门版块排行榜    

查看: 2369  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何提高毕赤酵母的表达量 已有2人参与

大家好,我这里有一个问题想请这里的前辈们帮忙解决一下,我们实验室已经将外源蛋白转入毕赤酵母中,外源蛋白的A+T区已经进行了同义密码子的替换,并去除了原有的信号肽,并对密码子和发酵条件进行了优化,一直处于摇瓶表达状态,可是表达量一直很低,该怎么办?上灌会有明显的提高吗,还是要换一种载体呢?我们原来用的载体是pPIC9K~启动子是pAOX1,麻烦有经验的前辈们指教一下~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我们飞哈

铜虫 (小有名气)

楼主做不做酿酒酵母?你有ADH2启动子的序列吗?
9楼2015-04-21 08:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

新版西游记

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-24 09:17:53
坦荡荡2014: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-03-24 12:57:30
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体,用g418梯度筛选,一般拷贝数高表达量高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
勇往直前
2楼2015-03-23 20:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 新版西游记 at 2015-03-23 20:55:01
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体,用g418梯度筛选,一般拷贝数高表达量高。

前期,师姐已经试过把拷贝数提高,可是表达量还是不理想~
3楼2015-03-24 08:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 新版西游记 at 2015-03-23 20:55:01
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体,用g418梯度筛选,一般拷贝数高表达量高。

谢谢你谢谢你的回复,请问还有什么方法可以解决吗?您也是做酵母这块的吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-03-24 08:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
信息提示
请填处理意见