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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母发酵诱导表达
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 毕赤酵母发酵诱导表达 已有5人参与

毕赤酵母发酵过程中，甲醇的诱导浓度是否与菌体生长密度有关系呢，例如第一批菌体OD600值300左右，第二批菌体OD600值500左右，那么第二批是否要将甲醇诱导浓度增加呢？
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1楼 2014-03-12 09:26:23
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bio-boy: 金币+2 2014-03-12 15:12:56
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-03-12 17:45:48
菌体浓度、甲醇浓度和设备供氧能力达到一个平衡为最好
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2楼2014-03-12 14:51:45
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reallpf

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by bio-boy at 2014-03-18 22:20:03
不是高密度培养吗？...

高密度并不是诱导的时候OD越大越好，而是开始诱导后，OD值越来越大是较好的。
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10楼2014-03-19 00:06:40
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普通回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+3, 谢谢应助 2014-03-16 11:22:50
按你描述的，肯定是发酵罐了。多大的？甘油补料后，OD在300左右诱导最为合适。500太大，诱导不了了。你的第一批和第二批是什么意思？一级种子和二级种子吗？
毕赤酵母的诱导不好做，需要把控的点非常准确，很容易诱导失败或者表达结果不理想。
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3楼2014-03-13 19:41:05
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-13 19:41:05
按你描述的，肯定是发酵罐了。多大的？甘油补料后，OD在300左右诱导最为合适。500太大，诱导不了了。你的第一批和第二批是什么意思？一级种子和二级种子吗？
毕赤酵母的诱导不好做，需要把控的点非常准确，很容易诱 ...

是的，50L的发酵罐，第一批和第二批指的是两次单独的实验。OD500时为什么诱导不了了？
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4楼2014-03-16 10:53:03
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by bio-boy at 2014-03-16 10:53:03
是的，50L的发酵罐，第一批和第二批指的是两次单独的实验。OD500时为什么诱导不了了？...

OD太大，菌的活力已经不够了，诱导产量会很低。
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5楼2014-03-18 00:15:15
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baoqie121314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2014-04-10 17:13:26
你不要用OD测量啊，太大就不准了，测量湿重，而且加甲醇诱导与DO有关也，你应该补加甲醇，不是一次性加多少，量大，毒性就大
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6楼2014-03-18 05:07:47
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hahalisonia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

外行，不过，真有BITCH酵母？名字都够悲剧的
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爱生活，爱拼搏
7楼2014-03-18 07:34:57
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-03-18 05:07:47
你不要用OD测量啊，太大就不准了，测量湿重，而且加甲醇诱导与DO有关也，你应该补加甲醇，不是一次性加多少，量大，毒性就大

发酵液稀释以后再测OD啊，是梯度流加的甲醇，不是分批加入的。
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8楼2014-03-18 22:19:09
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-18 00:15:15
OD太大，菌的活力已经不够了，诱导产量会很低。...

不是高密度培养吗？
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9楼2014-03-18 22:20:03
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