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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-19 00:06:40
高密度并不是诱导的时候OD越大越好,而是开始诱导后,OD值越来越大是较好的。...

请问有文献试验依据吗?
11楼2014-03-22 13:32:51
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-19 00:06:40
高密度并不是诱导的时候OD越大越好,而是开始诱导后,OD值越来越大是较好的。...

请问有文献实验依据吗?
12楼2014-03-24 10:10:49
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by bio-boy at 2014-03-24 10:10:49
请问有文献实验依据吗?...

这个是有依据的,但是具体的我不能给出文献的题目了。你可以搜索下毕赤酵母发酵以及响应面分析相关的文章看看。
另外这个常识问题通过摇瓶也是可以得到验证的,并不是诱导时OD越大越好的。
13楼2014-03-24 22:38:08
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-24 22:38:08
这个是有依据的,但是具体的我不能给出文献的题目了。你可以搜索下毕赤酵母发酵以及响应面分析相关的文章看看。
另外这个常识问题通过摇瓶也是可以得到验证的,并不是诱导时OD越大越好的。...

诱导后菌体OD再继续增加,那么补入的碳氮源大部分被用于菌体物质的构建了,请问合成蛋白所需的原料相应的要减少了,表达量怎么会增加?!
14楼2014-04-03 12:35:26
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by bio-boy at 2014-04-03 12:35:26
诱导后菌体OD再继续增加,那么补入的碳氮源大部分被用于菌体物质的构建了,请问合成蛋白所需的原料相应的要减少了,表达量怎么会增加?!...

都是个人意见,仅供参考。

你想的角度是对的,但是不要钻牛角尖,任何都是需要一个适度,小了不行,太大了也不行,这些都是前人的经验总结而来的。

所有回复的观点均可以直接通过实验来验证。祝好运!
15楼2014-04-04 00:33:52
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-13 19:41:05
按你描述的,肯定是发酵罐了。多大的?甘油补料后,OD在300左右诱导最为合适。500太大,诱导不了了。你的第一批和第二批是什么意思?一级种子和二级种子吗?
毕赤酵母的诱导不好做,需要把控的点非常准确,很容易诱 ...

哥们,你看好了,人家是用的酵母表达,不是大肠,和甘油有啥关系?补的是甲醇
16楼2014-04-09 11:01:00
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by wentanbaodao at 2014-04-09 11:01:00
哥们,你看好了,人家是用的酵母表达,不是大肠,和甘油有啥关系?补的是甲醇...

常识性的问题争辩意义不大。

毕赤酵母一级种子做好后转达二级罐,碳源消耗完毕后OD值较小,不适合直接甲醇诱导,需要继续添加甘油连续碳源补料,到达合适的OD值后才补料甲醇进行诱导。

你做毕赤酵母吗?毕赤酵母就和甘油没有关系?看帖子也要把描述的问题看清楚了再说成么。
17楼2014-04-10 16:54:21
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