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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 毕赤酵母发酵诱导表达 已有5人参与

毕赤酵母发酵过程中,甲醇的诱导浓度是否与菌体生长密度有关系呢,例如第一批菌体OD600值300左右,第二批菌体OD600值500左右,那么第二批是否要将甲醇诱导浓度增加呢?
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-24 22:38:08
这个是有依据的,但是具体的我不能给出文献的题目了。你可以搜索下毕赤酵母发酵以及响应面分析相关的文章看看。
另外这个常识问题通过摇瓶也是可以得到验证的,并不是诱导时OD越大越好的。...

诱导后菌体OD再继续增加,那么补入的碳氮源大部分被用于菌体物质的构建了,请问合成蛋白所需的原料相应的要减少了,表达量怎么会增加?!
14楼2014-04-03 12:35:26
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bio-boy: 金币+2 2014-03-12 15:12:56
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-03-12 17:45:48
菌体浓度、甲醇浓度和设备供氧能力达到一个平衡为最好
2楼2014-03-12 14:51:45
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+3, 谢谢应助 2014-03-16 11:22:50
按你描述的,肯定是发酵罐了。多大的?甘油补料后,OD在300左右诱导最为合适。500太大,诱导不了了。你的第一批和第二批是什么意思?一级种子和二级种子吗?
毕赤酵母的诱导不好做,需要把控的点非常准确,很容易诱导失败或者表达结果不理想。
3楼2014-03-13 19:41:05
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bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by reallpf at 2014-03-13 19:41:05
按你描述的,肯定是发酵罐了。多大的?甘油补料后,OD在300左右诱导最为合适。500太大,诱导不了了。你的第一批和第二批是什么意思?一级种子和二级种子吗?
毕赤酵母的诱导不好做,需要把控的点非常准确,很容易诱 ...

是的,50L的发酵罐,第一批和第二批指的是两次单独的实验。OD500时为什么诱导不了了?
4楼2014-03-16 10:53:03
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