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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于毕赤酵母表达载体
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627455987

木虫 (小有名气)

[交流] 关于毕赤酵母表达载体

请教各位大侠，小弟最近在做毕赤酵母的工程菌，请问在构建载体（pPICZaA）转化进大肠和酵母以后，要在平板上进行筛选，Zeocin能否按一定浓度直接涂布在平板上之后再涂布菌液？还是需要将Zeocin与培养基先混合后再倒平板？  小弟新手请各位不吝赐教，谢谢！
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1楼 2012-08-10 14:53:57
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回帖置顶 ( 共有8个 )

userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
http://wenku.baidu.com/view/760e8b28453610661ed9f436.html
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2楼2012-08-10 15:37:18
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wt3532

木虫 (著名写手)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
肯定是抗生素和培养基混合了
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3楼2012-08-13 08:23:33
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reallpf

木虫 (正式写手)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
不能涂在平板表明，要混合后到平板
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5楼2012-08-13 09:36:26
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limin2012

铜虫 (正式写手)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
先涂抗生素，平板干后再涂菌液。
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8楼2012-08-13 12:36:45
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627455987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by limin2012 at 2012-08-13 12:36:45
先涂抗生素，平板干后再涂菌液。

谢谢您的回复，请问这样做与混合后再倒平板有多大差异？您就是这样做的吗？
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9楼2012-08-13 16:51:50
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627455987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wt3532 at 2012-08-13 08:23:33
肯定是抗生素和培养基混合了

请问我要是先涂抗生素再涂菌液，这样影响大吗？谢谢
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10楼2012-08-13 16:55:04
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limin2012

铜虫 (正式写手)
我将酵母载体转大肠的时候是这样做的。你也可以倒培养基平板时先加入抗生素再倒平板。
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11楼2012-08-14 08:46:24
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xbl3688

银虫 (正式写手)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
9楼: Originally posted by 627455987 at 2012-08-13 16:51:50
谢谢您的回复，请问这样做与混合后再倒平板有多大差异？您就是这样做的吗？...

其一，涂布的抗生素还是没有加在培养基液体里边混的均匀；其二，涂布的抗生素只限于表层，如果平板放置久一点的话，抗生素有可能失效。
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12楼2012-08-14 09:10:58
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lihao1988903

金虫 (正式写手)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
混合后再涂平板。
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6楼2012-08-13 11:14:01
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八头小猪

铁杆木虫 (小有名气)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
我们都是培养基中加入抗生素后混匀再倒平板，注意平板要避光
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14楼2012-12-02 14:06:21
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gcworm

木虫 (职业作家)
路过，帮你顶一下
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15楼2012-12-03 13:59:50
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我是小披风

新虫 (初入文坛)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
毕赤酵母表达常用载体与14种培养基配方大全
http://elabbuy.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=247&fromuid=27
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16楼2015-07-15 08:07:29
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evil丶zero

金虫 (小有名气)
★
627455987(金币+1): 谢谢参与
做筛选最好不要嫌麻烦，建议先混合在倒平板。涂在平板上的话，Zeocin浓度分布不均匀，可能导致假阳性偏多。
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17楼2015-07-15 11:00:06
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简单回复
xiaoyi-19884楼
2012-08-13 09:33   回复  
627455987(金币+1): 谢谢参与
2009126227楼
2012-08-13 11:25   回复  
627455987(金币+1): 谢谢参与
祝福
yxu198613楼
2012-08-14 09:42   回复  
627455987(金币+1): 谢谢参与
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