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启动子2013

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 180.9
散金: 40
帖子: 128
在线: 47.6小时
虫号: 2616766
注册: 2013-08-26
性别: GG
专业: 环境微生物学

[求助] 刚做Q-pcr，很多不懂，求帮忙啊！已有3人参与

本人刚开始做Q-PCR，问下有谁知道这个溶解曲线的纵坐标derivative 代表什么意思呢？只知道单峰表示引物特异性，但有些引物溶解曲线的峰好高，有些好低，这代表什么意思？有些引物为什么没加模板（加的水）也有扩增，污染了吗？

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通往表达的启动子。

1楼2015-03-11 16:20:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

bbqlhb

木虫 (小有名气)

应助: 70 (初中生)
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在线: 127.3小时
虫号: 3365870
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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
启动子2013: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-03-12 14:13:39

不叫溶解曲线，是熔解曲线，是随温度升高，DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。先出来的是一条下坡线。
横坐标是温度，纵坐标是dna荧光度，SYBY Green染料结合在DNA双链间，所以有多少荧光产生就有多少DNA。
在温度逐步上升过程中，DNA开始降解，到达一定温度时候下坡的坡度最大（代表这类DNA最多），这就是你图上那种图，对纵坐标求导得出来的图。
所以这个高低形容的不是量而是速率。