24小时热门版块排行榜    

查看: 4478  |  回复: 5

fanfan3570

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Taqman探针法做qPCR,结果很差,求高手指导 已有1人参与

用Taqman探针法做qPCR,引物和探针都是参考的文献来得,之前用这个引物做过简单的PCR,是单一条带,但做qPCR结果很差,见附件中的图。探针换另外一个公司合成以后,结果还是没有好转,体系变化了结果也没有变化,跪求高手指导呀

Amplification Plot.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyixst

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fanfan3570(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-19 10:23:33
如果体系没有问题的话,就是探针不行呗,岂能相信文献
2楼2013-05-18 20:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卓尔why

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
像是没扩增出来,但曲线还连在一起,是不是你的模板浓度太高了啊
3楼2013-05-21 10:54:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

26264716

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuyixst at 2013-05-18 20:49:20
如果体系没有问题的话,就是探针不行呗,岂能相信文献

你哭着对他说,文献里都是骗人的,你不可能做出那结果。。哈哈
苦,才是人生
4楼2013-05-21 14:28:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanfan3570

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 卓尔why at 2013-05-21 10:54:22
像是没扩增出来,但曲线还连在一起,是不是你的模板浓度太高了啊

模板浓度不高呀,20ng左右
5楼2013-05-21 16:59:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你使用的模板是质粒还是基因组DNA,我最近也做这个,出现过你这种问题,20ng太多了,你不能用普通PCR的标准来做Q-PCR实验,如果是质粒模板,你可以梯度稀释一下;如果是基因组DNA,最好还是再稀释一下。如果你最终排除了模板问题,建议你提高一下退火温度。
6楼2015-07-30 16:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fanfan3570 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 9/450 2026-08-23 10:59 by Tide man
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见