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fanfan3570

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Taqman探针法做qPCR,结果很差,求高手指导已有1人参与

用Taqman探针法做qPCR,引物和探针都是参考的文献来得,之前用这个引物做过简单的PCR,是单一条带,但做qPCR结果很差,见附件中的图。探针换另外一个公司合成以后,结果还是没有好转,体系变化了结果也没有变化,跪求高手指导呀

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哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你使用的模板是质粒还是基因组DNA,我最近也做这个,出现过你这种问题,20ng太多了,你不能用普通PCR的标准来做Q-PCR实验,如果是质粒模板,你可以梯度稀释一下;如果是基因组DNA,最好还是再稀释一下。如果你最终排除了模板问题,建议你提高一下退火温度。
6楼2015-07-30 16:07:44
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