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summer2771

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR怎么会出现这种结果?

请教一下,我做qPCR,用2-ΔΔCT法,最后算出来的值居然是
0.000178
0.002233
0.021493这样的,我每组做了3个样本,每个样本做了3次重复,这是其中一个组的数据(重复已经进行了均数计算,相差都不大的)但是的出来的结果为什么都呈这种10甚至100倍的差距呢?这样的话还能统计么,那标准差岂不是很大啊?
请大神指教!谢谢!
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蓝天_1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题不怎么明白,貌似不能吧。
2楼2012-11-26 18:45:24
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把你的扩增曲线传上来看看,不能光看计算结果

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2012-11-26 19:18:57
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
summer2771: 金币+5, ★有帮助 2012-12-23 02:51:23
如果是突变株与野生型的话,有这种差值也不算离谱吧……我的突变株和野生型某基因转录量上就有这么大差异
4楼2012-11-26 19:23:47
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summer2771

木虫 (正式写手)

我全是野生型啊,ICR远交啊,就算是有个体差异,不至于这么大数量级上的差别吧?复孔做的挺好的啊,差异很小。真是服了...
这种情况我自己想的话除了自己剔除掉那些偏离得挺厉害的值以外,没有别的办法了吧?悲惨的是,我每个组只做了3个样,这一剔除,有几个组就相当于是两个样本求均数了....唉,可怎么办啊...
5楼2012-11-26 23:56:05
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summer2771

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-26 19:18:57
把你的扩增曲线传上来看看,不能光看计算结果

谢谢您的回复,我的图还没拷回来,等拷回来以后发上来请您看看哈?!先谢过了!!
6楼2012-11-26 23:56:48
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by summer2771 at 2012-11-26 23:56:48
谢谢您的回复,我的图还没拷回来,等拷回来以后发上来请您看看哈?!先谢过了!!...

不客气,也没帮上什么忙,祝实验顺利!
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2012-11-27 00:14:33
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labbench

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道某个朋友的话对不对:先从便宜货找原因。
8楼2012-11-27 11:20:31
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summer2771

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by labbench at 2012-11-27 11:20:31
不知道某个朋友的话对不对:先从便宜货找原因。

应该不会额,买的宝生物的盒子,应该是还可以的啊,反响不是一直不错嘛?枪头什么的全都是进口的...没想着去省钱的本来就。没想到做出这种结果。
大家一般做PCR都是每组几个样啊?上次听一个讲座说要n大于6...好贵啊这么多...
9楼2012-11-27 15:39:43
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