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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » qPCR怎么会出现这种结果？
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summer2771

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR怎么会出现这种结果？

请教一下，我做qPCR，用2-ΔΔCT法，最后算出来的值居然是
0.000178
0.002233
0.021493这样的，我每组做了3个样本，每个样本做了3次重复，这是其中一个组的数据（重复已经进行了均数计算，相差都不大的）但是的出来的结果为什么都呈这种10甚至100倍的差距呢？这样的话还能统计么，那标准差岂不是很大啊？
请大神指教！谢谢！
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1楼 2012-11-26 15:09:27
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蓝天_1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题不怎么明白，貌似不能吧。
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2楼2012-11-26 18:45:24
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把你的扩增曲线传上来看看，不能光看计算结果
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

summer2771
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2012-11-26 19:18:57
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
summer2771: 金币+5, ★有帮助 2012-12-23 02:51:23
如果是突变株与野生型的话，有这种差值也不算离谱吧……我的突变株和野生型某基因转录量上就有这么大差异
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4楼2012-11-26 19:23:47
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summer2771

木虫 (正式写手)
我全是野生型啊，ICR远交啊，就算是有个体差异，不至于这么大数量级上的差别吧？复孔做的挺好的啊，差异很小。真是服了...
这种情况我自己想的话除了自己剔除掉那些偏离得挺厉害的值以外，没有别的办法了吧？悲惨的是，我每个组只做了3个样，这一剔除，有几个组就相当于是两个样本求均数了....唉，可怎么办啊...
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5楼2012-11-26 23:56:05
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summer2771

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-26 19:18:57
把你的扩增曲线传上来看看，不能光看计算结果

谢谢您的回复，我的图还没拷回来，等拷回来以后发上来请您看看哈？！先谢过了！！
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6楼2012-11-26 23:56:48
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by summer2771 at 2012-11-26 23:56:48
谢谢您的回复，我的图还没拷回来，等拷回来以后发上来请您看看哈？！先谢过了！！...

不客气，也没帮上什么忙，祝实验顺利！
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2012-11-27 00:14:33
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labbench

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道某个朋友的话对不对：先从便宜货找原因。
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8楼2012-11-27 11:20:31
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summer2771

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by labbench at 2012-11-27 11:20:31
不知道某个朋友的话对不对：先从便宜货找原因。

应该不会额，买的宝生物的盒子，应该是还可以的啊，反响不是一直不错嘛？枪头什么的全都是进口的...没想着去省钱的本来就。没想到做出这种结果。
大家一般做PCR都是每组几个样啊？上次听一个讲座说要n大于6...好贵啊这么多...
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9楼2012-11-27 15:39:43
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