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启动子2013

新虫 (小有名气)

[求助] 刚做Q-pcr,很多不懂,求帮忙啊! 已有3人参与

本人刚开始做Q-PCR,问下有谁知道这个溶解曲线的纵坐标derivative 代表什么意思呢?只知道单峰表示引物特异性,但有些引物溶解曲线的峰好高,有些好低,这代表什么意思?有些引物为什么没加模板(加的水)也有扩增,污染了吗?

刚做Q-pcr,很多不懂,求帮忙啊!
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刚做Q-pcr,很多不懂,求帮忙啊!-1
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刚做Q-pcr,很多不懂,求帮忙啊!-2
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通往表达的启动子。
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
启动子2013: 金币+2 2015-03-12 14:14:10
纵坐标是吸光度曲线的导数,峰说明吸光度明显增加
3楼2015-03-11 17:27:12
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查看全部 5 个回答

bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
启动子2013: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-03-12 14:13:39
不叫溶解曲线,是熔解曲线,是随温度升高,DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。先出来的是一条下坡线。
横坐标是温度,纵坐标是dna荧光度,SYBY Green染料结合在DNA双链间,所以有多少荧光产生就有多少DNA。
在温度逐步上升过程中,DNA开始降解,到达一定温度时候下坡的坡度最大(代表这类DNA最多),这就是你图上那种图,对纵坐标求导得出来的图。
所以这个高低形容的不是量而是速率。
2楼2015-03-11 17:03:10
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
启动子2013: 金币+2 2015-03-12 14:14:30
呵呵,不知道是否有用,

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  • 附件 1 : qPCR中文操作手册.pdf
  • 2015-03-12 09:56:01, 1.33 M
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-03-12 09:56:01
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