24小时热门版块排行榜    

查看: 8472  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

BBMC-2012

木虫 (知名作家)


[交流] pcr 产物测序后双峰,我该怎么办?

pcr 产物测序后双峰,我该怎么办?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Forlornhope

新虫 (初入文坛)


★ ★
BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
BBMC-2012: 金币+1 2015-03-14 08:46:01
目测这种换公司也无济于事呀。把问题找到才是王道。我觉得可能有三种原因:一,pcr产物不纯,电泳条带单一并不一定就说明没有非特异性扩增,也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近,或浓度很低。解决办法是提高退火温度做pcr,或直接换pcr引物,再或者可以补订专门的测序引物做测序反应,提高测序反应特异性。二,pcr产物纯化做的有问题,可补做纯化看看。三,就是你送样的测序引物有污染,可补送引物测序。如果你做的是克隆测序,还有可能是纯在双克隆,楼主最好上图,这样会比较清楚

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-03-14 07:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

qiaobethy

铁虫 (初入文坛)



BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
重测或者是换公司重测。
5楼2015-03-10 13:34:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小威斯

铁虫 (小有名气)



BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
测序一般的开头和结尾很容易出现双峰,重测吧或者换公司
7楼2015-03-10 15:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wrongfeng

新虫 (小有名气)



BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
你的目的是什么呢?
1、如果PCR产物是特异性的单一条带,那可能是测序公司的问题,解决方法就是换加公司试试;
2、如果PCR产物非特异性的,可以用连接载体转化测序的方法。
8楼2015-03-10 16:10:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见