应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr 产物测序后双峰，我该怎么办？
51/1返回列表
查看: 8235  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

BBMC-2012

木虫 (知名作家)

[交流] pcr 产物测序后双峰，我该怎么办？

pcr 产物测序后双峰，我该怎么办？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2015-03-10 10:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaobethy

铁虫 (初入文坛)
★
BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
重测或者是换公司重测。
赞一下 回复此楼
5楼2015-03-10 13:34:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

小威斯

铁虫 (小有名气)
★
BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
测序一般的开头和结尾很容易出现双峰，重测吧或者换公司
赞一下 回复此楼
7楼2015-03-10 15:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wrongfeng

新虫 (小有名气)
★
BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
你的目的是什么呢？
1、如果PCR产物是特异性的单一条带，那可能是测序公司的问题，解决方法就是换加公司试试；
2、如果PCR产物非特异性的，可以用连接载体转化测序的方法。
赞一下 回复此楼
8楼2015-03-10 16:10:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Forlornhope

新虫 (初入文坛)
★ ★
BBMC-2012(金币+1): 谢谢参与
BBMC-2012: 金币+1 2015-03-14 08:46:01
目测这种换公司也无济于事呀。把问题找到才是王道。我觉得可能有三种原因：一，pcr产物不纯，电泳条带单一并不一定就说明没有非特异性扩增，也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近，或浓度很低。解决办法是提高退火温度做pcr,或直接换pcr引物，再或者可以补订专门的测序引物做测序反应，提高测序反应特异性。二，pcr产物纯化做的有问题，可补做纯化看看。三，就是你送样的测序引物有污染，可补送引物测序。如果你做的是克隆测序，还有可能是纯在双克隆，楼主最好上图，这样会比较清楚

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-03-14 07:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭