应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒双酶切电泳图，大神指点一下
131/2返回列表12下一页
查看: 9130  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 质粒双酶切电泳图，大神指点一下 已有4人参与

这是我质粒双酶切后的电泳图，前三个条带是切后的样品，最后一个是原质粒，第一个marker是500bp的最大5000，第二个marker是1000bp的，我感觉酶切后的电泳条带和原质粒还是有区别的，为何后续连接导入还是没有阳性克隆？是酶切不行吗，还是连接有问题？

质粒双酶切电泳图，大神指点一下
C360_2014-12-16-19-57-29-995.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-16 23:27:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)
我最近也碰到类似情况  期待大神们的指点
赞一下 回复此楼
学术研究
2楼2014-12-17 09:13:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by searush at 2014-12-17 09:13:10
我最近也碰到类似情况  期待大神们的指点

嗯，刚开始做，什么都得摸索，文献中的东西只能借鉴不能迷信

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-17 11:37:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
搂住做的是空质粒的双酶切？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
我要让你的生活因为有我而更精彩
4楼2014-12-17 11:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 甲方不怕乙方 at 2014-12-17 11:45:18
搂住做的是空质粒的双酶切？

对，就是原质粒酶切，切出来后再把片段连上去啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-17 12:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒质量高吗？双酶切体系有问题吗？buffer有问题吗？酶切时间建议长一点，过夜，在跑一个图看看
赞一下 回复此楼
踏实
6楼2014-12-17 14:30:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
之前遇到类似的问题，后来解决啦，酶切质粒质量高一些，时间就一些，试试，你的未酶切质粒浓度太低，跑的图也不亮
赞一下 回复此楼
踏实
7楼2014-12-17 14:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hajierlove at 2014-12-17 14:31:18
之前遇到类似的问题，后来解决啦，酶切质粒质量高一些，时间就一些，试试，你的未酶切质粒浓度太低，跑的图也不亮

我没懂你的意思？能详细点说嘛？未酶切的质粒只是做个对比的呀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
8楼2014-12-17 16:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by liuwukang at 2014-12-17 16:58:09
我没懂你的意思？能详细点说嘛？未酶切的质粒只是做个对比的呀
...

未切的质粒跑出来是三条线，从上到下依次，开环，线性，超螺旋，你酶切彻底的话，可以明显看出，你酶切之后的是和第二条在一条线上。
赞一下 回复此楼
踏实
9楼2014-12-17 19:42:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hajierlove at 2014-12-17 19:42:02
未切的质粒跑出来是三条线，从上到下依次，开环，线性，超螺旋，你酶切彻底的话，可以明显看出，你酶切之后的是和第二条在一条线上。...

所以我这个原质粒跑的也不大对？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-12-17 21:09:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuwukang 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 求调剂 +6 十三加油 2026-03-21 6/300 2026-03-22 17:00 by i_cooler
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +3 vv迷 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:18 by 杨杨杨紫
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸！ 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生（接收计算机专业调剂） +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭