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ggyy0911铁虫 (正式写手)
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怀疑提质粒时提到了杂菌的质粒，求大家给帮着分析分析 已有2人参与
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第一次提质粒之后跑了电泳，重组质粒应该是7000，没线性化跑的时候4000那有非常亮的条带，但是7000那只有隐隐约约的条带，而且某些样品点样孔发亮。虽然没线性化看不出实际大小，但大小是差不多的，不会相差3000bp这么多。我用的质粒是pEASY Blunt Simple，空质粒就是4000. 随后我用通用引物，以质粒为模板跑了PCR，都跑出了3000的目的条带，诡异的是某些样品点样孔依然发亮。第一次跑PCR产物有这种情况。 然后我又用EcoRI和NotI双酶切过夜，跑了电泳，能切出两条带，并且大小相符。而且没有杂带…… 我以为是我提质粒提不好，又认真的提了一次，还是和第一次一样，4000那非常亮，7000（也就是重组质粒应该在的地方）反而只有隐约的条带。 当时觉得结果不好都没留图，烦大家看文字吧。 |
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