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连接转化时涂板阴性对照也长菌 已有2人参与
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近期涂板长的菌落一直像图片中这样，原以为是菌液浓度太高，就连接后加600ul无AMP液体培养基摇床150rpm摇半小时，不离心，取菌液20ul涂板仍然是这样。后来考虑是倒板加AMP时温度太高，昨天倒板时专门用温度计测温到55度时才加AMP，用50ul菌液涂板，另外直接用TOP10感受态细胞做阴性对照，结果仍然像图中那样。昨天我还做了一组对照，就是涂板时加20ulAMP和50ul菌液，可能是没混匀的缘故，平板中间没有菌落，边缘有一些，还是连成片。 以上就是我对问题的描述，希望有遇到相同问题的高人给以指点，看看是什么缘故，如果在涂板时另加AMP，加多少合适？是按照培养基的体积（20ml左右）加，还是按照菌液的体积加合适。还有就是制板时我做了蓝白斑筛选，如果图片中长的都是杂菌的话，不应该显蓝色吗？希望高手指点。  20141203_084350.jpg |
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