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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[交流] 连接产物做转化涂板 已有6人参与

快14个小时了,只有一个板长了,其他好像都没长,是怎么回事?用的板可能放的时间有点长
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-17 12:48:01
都没长可能是因为没有连接成功。或者抗生素浓度太大了。
2楼2014-01-16 14:57:22
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jkjr111614

新虫 (初入文坛)

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-17 12:48:05
板子放的时间长只可能抗生素失效,长成一片
说明没连上,重新连接转化吧
3楼2014-01-16 16:01:20
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apple1127

捐助贵宾 (著名写手)


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我曾经放过24小时才长的,测序是目的片段

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-01-16 16:09:53
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sungel

银虫 (初入文坛)

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kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2014-01-17 12:48:10
1.时间短了,我曾经也有24小时才长出来的经历。
2.酶连不成功。注意vector : fragment摩尔比为3-6,取2-5ul做转化。而且你是完全没长出来,所以仔细检查你的fragment和酶切位点,延长fragment的酶切时间。
3.抗生素浓度过大。
还有些别的情况,那就要根据你的实验具体分析了。
5楼2014-01-16 22:05:30
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银杏酸酸

银虫 (小有名气)

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-17 12:48:15
时间可以长长点,我的感受态验证时用了40小时左右。但是现在我的连接转化长不出来。
6楼2014-01-17 10:38:53
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Be_Abuse

新虫 (初入文坛)


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amp是不是失效了?
7楼2014-01-17 10:45:24
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