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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 空超级感受态在氨苄抗性板上长出菌落
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胡化静

木虫 (小有名气)

[求助] 空超级感受态在氨苄抗性板上长出菌落 已有1人参与

自己制备的空的超级感受态电击后分别涂布LB和LBA板，LB板成片长出菌，可是LBA板也长出一些但菌落，比较多但与LB板比较少很多了，这是为什么？是氨苄失效还是染菌？了？
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啦啦啦
1楼 2014-08-19 11:06:02
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
胡化静: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-19 18:02:34
这种情况说明你制备的感受态里面有杂菌，也就是染菌了
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-08-19 12:44:55
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:06:13
这种现象不少见。原因很多，包括：1.氨苄没有混合均匀；2.染菌；3.操作用品被DNA污染，等等。你可以用质粒试做一个转化，检查一下转化子，如果结果没有出现异常的质粒，那这批感受态还是可以用的。
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自然如此美丽！
3楼2014-08-21 07:32:52
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胡化静

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-08-19 12:44:55
这种情况说明你制备的感受态里面有杂菌，也就是染菌了

我又做了一批，菌摇好后离心前我取了一点涂布氨苄平板，没有菌长出，就是说制作感受态前是没有染菌的。制作过程中我也很小心了，可是空超级感受态在氨苄抗性板上还是长出菌落了。
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啦啦啦
4楼2014-08-23 14:25:00
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胡化静

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Crocodile-YK at 2014-08-21 07:32:52
这种现象不少见。原因很多，包括：1.氨苄没有混合均匀；2.染菌；3.操作用品被DNA污染，等等。你可以用质粒试做一个转化，检查一下转化子，如果结果没有出现异常的质粒，那这批感受态还是可以用的。

用质粒试了，长的很好，几乎满版。怎么检测转化子？
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啦啦啦
5楼2014-08-23 14:26:04
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 胡化静 at 2014-08-23 14:26:04
用质粒试了，长的很好，几乎满版。怎么检测转化子？...

随便挑10个转化子菌落，接进培养基，明天把质粒提取出来，跑跑电泳，看是否一致，如果没有异常，你则感受态还是可以用的。10个菌落里有那么2到3个是不一样的，说明污染了，丢掉这些感受态细胞。
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自然如此美丽！
6楼2014-08-23 21:21:12
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