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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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胡化静

木虫 (小有名气)

[求助] 空超级感受态在氨苄抗性板上长出菌落 已有1人参与

自己制备的空的超级感受态电击后分别涂布LB和LBA板,LB板成片长出菌,可是LBA板也长出一些但菌落,比较多但与LB板比较少很多了,这是为什么?是氨苄失效还是染菌?了?
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
胡化静: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-19 18:02:34
这种情况说明你制备的感受态里面有杂菌,也就是染菌了
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-08-19 12:44:55
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:06:13
这种现象不少见。原因很多,包括:1.氨苄没有混合均匀;2.染菌;3.操作用品被DNA污染,等等。你可以用质粒试做一个转化,检查一下转化子,如果结果没有出现异常的质粒,那这批感受态还是可以用的。
自然如此美丽!
3楼2014-08-21 07:32:52
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胡化静

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-08-19 12:44:55
这种情况说明你制备的感受态里面有杂菌,也就是染菌了

我又做了一批,菌摇好后离心前我取了一点涂布氨苄平板,没有菌长出,就是说制作感受态前是没有染菌的。制作过程中我也很小心了,可是空超级感受态在氨苄抗性板上还是长出菌落了。
啦啦啦
4楼2014-08-23 14:25:00
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胡化静

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Crocodile-YK at 2014-08-21 07:32:52
这种现象不少见。原因很多,包括:1.氨苄没有混合均匀;2.染菌;3.操作用品被DNA污染,等等。你可以用质粒试做一个转化,检查一下转化子,如果结果没有出现异常的质粒,那这批感受态还是可以用的。

用质粒试了,长的很好,几乎满版。怎么检测转化子?
啦啦啦
5楼2014-08-23 14:26:04
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 胡化静 at 2014-08-23 14:26:04
用质粒试了,长的很好,几乎满版。怎么检测转化子?...

随便挑10个转化子菌落,接进培养基,明天把质粒提取出来,跑跑电泳,看是否一致,如果没有异常,你则感受态还是可以用的。10个菌落里有那么2到3个是不一样的,说明污染了,丢掉这些感受态细胞。
自然如此美丽!
6楼2014-08-23 21:21:12
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